PCR實(shí)驗(yàn)中DNA/RNA污染的危害主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：
一、實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性受影響
錯(cuò)誤的數(shù)據(jù)解讀：在RNA相關(guān)的實(shí)驗(yàn)中，如果DNA污染了RNA樣本，可能導(dǎo)致研究者錯(cuò)誤地解讀實(shí)驗(yàn)結(jié)果。例如，在基因表達(dá)分析中，DNA污染可能干擾RNA的逆轉(zhuǎn)錄和PCR擴(kuò)增過程，導(dǎo)致對(duì)基因表達(dá)水平的錯(cuò)誤估計(jì)。
影響基因表達(dá)分析：DNA污染可能掩蓋或模擬RNA的表達(dá)模式，使得研究者對(duì)基因功能和調(diào)控機(jī)制的理...
南美胎牛血清并非只有烏拉圭胎牛血清表現(xiàn)出色，但烏拉圭胎牛血清確實(shí)在全球范圍內(nèi)享有較高的聲譽(yù)，這主要得益于烏拉圭在多個(gè)方面的優(yōu)勢。首先，烏拉圭擁有優(yōu)質(zhì)的胎牛血清原料。烏拉圭的牛只養(yǎng)殖規(guī)模龐大，且牧場管理高效、集中，通過實(shí)施精細(xì)化的管理策略，有效遏制了動(dòng)物疫病，從而保障了胎牛血清的高品質(zhì)與安全性。這些優(yōu)質(zhì)的原料為烏拉圭胎牛血清的生產(chǎn)提供了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。其次，烏拉圭在胎牛血清的生產(chǎn)與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方面也非...
11月13日，國際學(xué)術(shù)期刊Nature Genetics在線發(fā)表了中國科學(xué)院分子細(xì)胞科學(xué)**創(chuàng)新中心（生物化學(xué)與細(xì)胞生物學(xué)研究所）高棟研究組的最新研究成果：“JAK/STAT signaling maintains an intermediate cell population during prostate basal cell fate determination”。該研究通過一系列增強(qiáng)...
PCR（聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)）技術(shù)是一種廣泛應(yīng)用于基因工程、分子生物學(xué)和遺傳學(xué)等領(lǐng)域的分子生物學(xué)技術(shù)。其核心在于通過特定的循環(huán)過程，將微量的DNA片段進(jìn)行指數(shù)級(jí)擴(kuò)增。這一過程中，水不僅作為反應(yīng)溶液的主要成分，還發(fā)揮著稀釋試劑、調(diào)節(jié)反應(yīng)體系pH值、提供反應(yīng)所需的離子和酶等多重作用。因此，在PCR實(shí)驗(yàn)中，使用高純度和無菌的水是至關(guān)重要的，尤其是PCR級(jí)別的水。高純度確保準(zhǔn)確性PCR反應(yīng)需要高純度的水來...
PCR實(shí)驗(yàn)，即聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)，是一種用于特異性擴(kuò)增DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。在進(jìn)行PCR實(shí)驗(yàn)時(shí)，需要注意多個(gè)問題和細(xì)節(jié)，以下是對(duì)這些問題及其原因的詳細(xì)歸納：
一、試劑與材料的選擇與準(zhǔn)備
試劑的質(zhì)量：
確保所有試劑（如ddH2O、引物、DNA模板、商業(yè)化的預(yù)混DNA酶等）均為高質(zhì)量且未過期。
不同品牌的試劑性能可能有所不同，因此需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇合適的試劑。
引物的設(shè)計(jì)：
引...
剛發(fā)表在《自然通訊》上的兩篇獨(dú)立研究論文報(bào)道了一個(gè)發(fā)現(xiàn)——在能量生產(chǎn)和核苷酸合成中發(fā)揮作用的代謝酶，在細(xì)胞核內(nèi)承擔(dān)了意想不到的“第二份工作”：協(xié)調(diào)細(xì)胞分裂和DNA修復(fù)等關(guān)鍵功能，它不僅挑戰(zhàn)了細(xì)胞生物學(xué)中長期存在的生物學(xué)范式，而且為癌癥治療開辟了新的途徑，特別是針對(duì)侵襲性腫瘤，如三陰性乳腺癌（TNBC）。幾十年來，生物學(xué)教科書對(duì)細(xì)胞功能進(jìn)行了整齊的劃分。線粒體是細(xì)胞的動(dòng)力源，細(xì)胞質(zhì)是蛋白質(zhì)合成...
南美胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS）作為細(xì)胞培養(yǎng)、藥物開發(fā)以及生物醫(yī)學(xué)研究中的重要生物試劑，其質(zhì)量和來源對(duì)于科研結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性很重要。南美地區(qū)，特別是烏拉圭、巴西和阿根廷，是全球胎牛血清的主要產(chǎn)地，這些國家以其嚴(yán)格的動(dòng)物健康管理和優(yōu)質(zhì)的血清生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)而聞名。烏拉圭：高效畜牧業(yè)與嚴(yán)格疫病管控烏拉圭，盡管國土面積相對(duì)較?。s17.62萬平方公里），但其畜牧業(yè)卻很高效...
番茄是一種重要的設(shè)施蔬菜，設(shè)施番茄生產(chǎn)中的弱光問題影響番茄的產(chǎn)量和果實(shí)品質(zhì)。研究表明紫外光UV-B信號(hào)通路能夠有效的抑制番茄的弱光徒長問題，改善番茄果實(shí)代謝，增強(qiáng)番茄果實(shí)著色。然而紫外光UV-B信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控番茄發(fā)育和代謝的機(jī)理有待深入研究。近日，上海交通大學(xué)農(nóng)業(yè)與生物學(xué)院尹若賀實(shí)驗(yàn)室與合作者在The Plant Journal雜志發(fā)表了題為SlSPA3 regulates the nucle...
在藥物發(fā)現(xiàn)中，靶向蛋白質(zhì)降解是一種選擇性地消除致病蛋白質(zhì)的方法。加州大學(xué)河濱分校的一個(gè)科學(xué)家團(tuán)隊(duì)使用了一種新方法來識(shí)別針對(duì)Pin1的蛋白質(zhì)降解物，Pin1是一種參與胰腺癌發(fā)展的蛋白質(zhì)。該團(tuán)隊(duì)今天在《美國國家科學(xué)院院刊》上報(bào)告說，他們已經(jīng)設(shè)計(jì)出了不僅能與Pin1緊密結(jié)合，而且能導(dǎo)致其不穩(wěn)定和細(xì)胞降解的藥物——這一發(fā)現(xiàn)可能為新的癌癥治療鋪平道路。在UCR醫(yī)學(xué)院生物醫(yī)學(xué)科學(xué)教授Maurizio P...
在細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，支原體污染是一個(gè)普遍且棘手的問題。據(jù)估計(jì)，細(xì)胞培養(yǎng)中的支原體污染率可高達(dá)15-35%，甚至在某些情況下達(dá)到63%。由于支原體感染難以通過肉眼檢測，且對(duì)細(xì)胞生長率影響較小，因此很容易被忽視，從而影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。本文旨在探討如何有效預(yù)防細(xì)胞實(shí)驗(yàn)超凈工作臺(tái)內(nèi)發(fā)生支原體污染。1. 控制環(huán)境污染環(huán)境是支原體污染的主要來源之一。因此，控制環(huán)境污染是預(yù)防支原體污染的首要任務(wù)。細(xì)胞培...
胎牛血清作為培養(yǎng)基的重要添加成分，在細(xì)胞培養(yǎng)過程中起著提供生長因子、激素、微量元素等營養(yǎng)物質(zhì)的作用，對(duì)于細(xì)胞的生長、增殖和分化十分重要。我們都知道，血清的血源產(chǎn)地不同，胎牛血清的價(jià)格差異比較大。這些差異巨大的血清在成分、功能上有哪些不同？該如何選擇血源不同的胎牛血清？ 目前，進(jìn)口的胎牛血清產(chǎn)地主要以澳洲、新西蘭、南美等地為主。與澳洲和新西蘭等相比，在歷史上，南美曾出現(xiàn)過大規(guī)模的口蹄疫、瘋牛病...
卡羅林斯卡學(xué)院細(xì)胞和分子生物系的研究人員在人類細(xì)胞如何產(chǎn)生能量方面有了重大發(fā)現(xiàn)。他們的研究發(fā)表在EMBO雜志上，揭示了線粒體如何轉(zhuǎn)移RNA （tRNA）分子的詳細(xì)機(jī)制，這對(duì)能量產(chǎn)生至關(guān)重要。線粒體被稱為細(xì)胞的“發(fā)電站”，它需要經(jīng)過適當(dāng)處理的tRNA來制造蛋白質(zhì)以提供能量。tRNA加工中的問題可能導(dǎo)致嚴(yán)重的線粒體疾病。直到現(xiàn)在，線粒體中tRNA成熟的確切過程還沒有被很好地理解?！拔覀兊难芯吭诜?..
在輔助生殖技術(shù)中，成熟的卵細(xì)胞或卵母細(xì)胞對(duì)受精至關(guān)重要。然而，一些“脫落”的卵母細(xì)胞，或那些缺乏保護(hù)性顆粒細(xì)胞層的卵母細(xì)胞，不能成熟。現(xiàn)在，在信州大學(xué)研究人員的一項(xiàng)新研究中，研究小組已經(jīng)開發(fā)出一種在實(shí)驗(yàn)室中從這些脫落的卵母細(xì)胞中培養(yǎng)成熟卵母細(xì)胞的方法。這種創(chuàng)新的方法有望克服生殖科學(xué)中的重大挑戰(zhàn)，標(biāo)志著生育研究的重大進(jìn)步。輔助生殖技術(shù)（ART）是一種從卵巢中取出卵子，與體外精子結(jié)合，然后將胚胎...
含EDTA的胰酶和普通胰酶各有其特點(diǎn)和適用場景，無法一概而論哪個(gè)更好，而是需要根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)或應(yīng)用需求來選擇。含EDTA的胰酶成分與特性：含EDTA的胰酶是在普通胰酶的基礎(chǔ)上添加了EDTA（乙二胺四乙酸）成分。EDTA是一種螯合劑，能夠與金屬離子（如Mg2?、Ca2?等）形成穩(wěn)定的絡(luò)合物，有助于降低細(xì)胞間的粘附力，從而增強(qiáng)胰酶的消化效果。消化效率：由于EDTA的作用，含EDTA的胰酶在消化細(xì)胞...
在細(xì)胞培養(yǎng)的實(shí)驗(yàn)過程中，懸浮細(xì)胞的成簇生長是一種常見的現(xiàn)象，這一現(xiàn)象背后蘊(yùn)含著復(fù)雜的生物學(xué)機(jī)制和多方面的培養(yǎng)因素。本文將從細(xì)胞本身生長特性、培養(yǎng)條件以及操作技術(shù)等多個(gè)角度，探討體外培養(yǎng)的懸浮細(xì)胞成簇生長的原因及其影響。細(xì)胞本身生長特性首先，細(xì)胞本身的生長特性是導(dǎo)致懸浮細(xì)胞成簇生長的重要因素之一。有些細(xì)胞天生具有抱團(tuán)生長的特性，例如NCI-H716人結(jié)直腸腺癌細(xì)胞和NK92MI細(xì)胞等，這些細(xì)胞...
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，貼壁細(xì)胞的大面積脫壁是一個(gè)常見且需要重視的問題。細(xì)胞的脫壁不僅影響細(xì)胞的生長和增殖，還可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗，甚至影響后續(xù)的研究結(jié)果。本文將從多個(gè)方面探討貼壁細(xì)胞脫壁的原因，并提出相應(yīng)的解決方案。一、細(xì)胞質(zhì)量不佳細(xì)胞本身的健康狀況是影響其貼壁能力的重要因素。細(xì)胞老化、受到細(xì)菌或真菌污染、細(xì)胞培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質(zhì)不足等，都可能導(dǎo)致細(xì)胞質(zhì)量下降，進(jìn)而出現(xiàn)脫壁現(xiàn)象。因此，在細(xì)胞培養(yǎng)前，應(yīng)確...
“RNA世界”假說認(rèn)為，地球上最早的生命可能是以RNA為基礎(chǔ)的。在許多方面與DNA相似的單鏈分子；就像一些現(xiàn)代病毒。這是因?yàn)?，像DNA一樣，RNA可以攜帶遺傳信息，但像蛋白質(zhì)一樣，它也可以作為一種酶，啟動(dòng)或加速反應(yīng)。而少數(shù)RNA酶的活性，稱為核酶，在逐個(gè)測試的基礎(chǔ)上，通過計(jì)算預(yù)測，從細(xì)菌到植物和動(dòng)物的生物體中存在著數(shù)千種以上的基因。現(xiàn)在，賓夕法尼亞州立大學(xué)的研究人員開發(fā)了一種新方法，可以在一...
在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，貼壁細(xì)胞復(fù)蘇后大量漂浮是一個(gè)常見且令人困擾的問題。這一現(xiàn)象不僅影響了細(xì)胞的生長和增殖，還可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。原因分析1. 傳代前細(xì)胞密度過大：細(xì)胞在復(fù)蘇后，如果傳代前的細(xì)胞密度過大，即細(xì)胞融合度超過80%，可能會(huì)導(dǎo)致傳代后細(xì)胞漂浮。這是因?yàn)檫^高的細(xì)胞密度會(huì)增加細(xì)胞間的接觸抑制，影響細(xì)胞的貼壁能力。2. 細(xì)胞狀態(tài)不佳：細(xì)胞在凍存和復(fù)蘇過程中，可能會(huì)受到各種因素的影響，導(dǎo)致細(xì)胞狀...
含EDTA的胰酶和普通胰酶在細(xì)胞消化過程中具有不同的特性和作用機(jī)制，主要體現(xiàn)在以下幾個(gè)方面：一、成分差異含EDTA的胰酶：除了含有胰酶這一主要成分外，還添加了EDTA（乙二胺四乙酸）。EDTA是一種金屬螯合劑，能夠與細(xì)胞表面的Ca2?或Mg2?等二價(jià)金屬陽離子結(jié)合，從而破壞細(xì)胞間的連接，促進(jìn)細(xì)胞的解離。普通胰酶：主要成分為胰酶，它能夠水解細(xì)胞間的蛋白質(zhì)，破壞細(xì)胞間的連接，使細(xì)胞從培養(yǎng)皿或培養(yǎng)...
剛復(fù)蘇的細(xì)胞在特定情況下可以使用支原體清除劑。支原體清除劑通常用于處理被支原體污染的細(xì)胞培養(yǎng)物，通過抑制支原體DNA的復(fù)制和蛋白合成來達(dá)到清除支原體的效果。對(duì)于剛復(fù)蘇的細(xì)胞，如果確認(rèn)存在支原體污染，并且污染程度嚴(yán)重，使用支原體清除劑可能是一個(gè)有效的搶救措施。然而，在使用支原體清除劑時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：確認(rèn)污染：在使用支原體清除劑之前，應(yīng)首先通過支原體檢測試劑盒等方法確認(rèn)細(xì)胞確實(shí)存在支原體污...
賓州大學(xué)公園“RNA世界”假說提出，地球上最早的生命可能是基于RNA——一種在許多方面與DNA相似的單鏈分子——就像一些現(xiàn)代病毒一樣。這是因?yàn)椋馜NA一樣，RNA可以攜帶遺傳信息，但像蛋白質(zhì)一樣，它也可以作為一種酶，啟動(dòng)或加速反應(yīng)。雖然一些核糖核酸酶（核糖酶）的活性已經(jīng)在個(gè)案基礎(chǔ)上進(jìn)行了測試，但通過計(jì)算預(yù)測，從細(xì)菌到植物和動(dòng)物的生物體中存在著數(shù)千種以上的核糖核酸酶。現(xiàn)在，賓夕法尼亞州立大學(xué)...
在DNA實(shí)驗(yàn)過程中，確保DNA樣本的完整性和高效擴(kuò)增是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵。然而，DNA樣本在反應(yīng)管中的非特異性吸附一直是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的重要因素。為了解決這一問題，科學(xué)家們研發(fā)了低結(jié)合反應(yīng)管，這種特殊設(shè)計(jì)的反應(yīng)管能夠顯著減少DNA在管壁上的吸附，從而提高實(shí)驗(yàn)的效率和準(zhǔn)確性。一、低結(jié)合反應(yīng)管的材料與設(shè)計(jì)低結(jié)合反應(yīng)管的核心在于其特殊的材料與設(shè)計(jì)。這些反應(yīng)管通常采用低吸附材料制成，如特殊的雙鏈聚合...
II型炎癥是以II型細(xì)胞因子（如 IL-4、IL-5 和 IL-13）的分泌和嗜酸性粒細(xì)胞（Eosinophils）的浸潤為主要特征的炎癥過程。過度的II型炎癥可以導(dǎo)致一系列病理過程，如哮喘、過敏性皮炎和肺纖維化等。隨著研究的進(jìn)展，不依賴抗原識(shí)別過程的黏膜天然免疫細(xì)胞ILC2s（II型固有淋巴樣細(xì)胞）越來越被認(rèn)為是早期啟動(dòng)II型炎癥的核心免疫細(xì)胞群。因此，鑒定調(diào)節(jié)ILC2s應(yīng)答的關(guān)鍵分子對(duì)于...
在生物技術(shù)和制藥行業(yè)中，支原體檢測是確保產(chǎn)品質(zhì)量和安全性至關(guān)重要的一環(huán)。傳統(tǒng)的支原體檢測方法，如培養(yǎng)法和指示細(xì)胞培養(yǎng)法，因其檢測周期長、靈敏度不足等問題，逐漸無法滿足現(xiàn)代生產(chǎn)的高效率和高質(zhì)量要求。因此，核酸擴(kuò)增技術(shù)（NAT）作為一種快速、靈敏的支原體檢測方法，正逐步被行業(yè)接受和應(yīng)用。然而，根據(jù)中國藥典、美國藥典、歐洲藥典和日本藥典的建議，NAT法在替代傳統(tǒng)方法前，必須經(jīng)過嚴(yán)格的方法學(xué)驗(yàn)證。 ...
近期，我校河南省腦靶向生物納米藥物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室的研究論文以“Targeted protein degradation via cellular trafficking of nanoparticles”為題在Nature Nanotechnology（影響因子38.1）期刊上發(fā)表，該研究發(fā)現(xiàn)抗體、多肽修飾的納米顆粒在細(xì)胞運(yùn)輸過程中自發(fā)地會(huì)啟動(dòng)靶向蛋白降解，基于此提出了一種基于納米顆粒的靶向蛋白...
