常規PCR Kit （一步法）
Venor?Gem OneStep
品名 | 貨號 | 規格 | 價格 |
常規PCR Kit （一步法） Venor?Gem OneStep | 11-8025 | 25次/盒 | 詢價 |
11-8050 | 50次/盒 | 詢價 |
11-8100 | 100次/盒 | 詢價 |
11-8250 | 250次/盒 | 詢價 |
常規PCR法介紹
常規PCR法：是根據支原體核糖體16s-23s rRNA的特異保守序列設計引物，對待檢樣本DNA進行擴增，通過對擴增產物的大小分析作出診斷。
優點：①靈敏度高，特異性好。②時間短，2-3小時出結果。③操作簡單。
缺點：①對于已做支原體滅活處理的樣品，由于支原體DNA仍舊存在其中，PCR結果會出現假陽性（可用培養法做補充驗證）。②不同廠家生產的試劑盒質量差異巨大（由于引物及內在設計不同），需謹慎選擇，盡量在專業人員推薦指導下使用。
『支原體常規PCR檢測試劑盒』介紹
德國MB公司生產的支原體常規PCR檢測試劑盒，依據操作步驟的細微差別，分一步法和經典法兩類。此兩類試劑盒較全球其他廠家同類產品，具有以下獨特的優點：
①高特異性，一次檢測即可涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種，根據序列一致性，至少可以檢測到107種支原體物種。操作簡單，易于觀察（使用MB的試劑盒，下表中列出的支原體物種均為陽性，其他微生物或真核細胞均為陰性，無交叉反應）。
支原體PCR檢測試劑盒（一步法）可檢測物種
②高靈敏度，1-5拷貝/μl的支原體DNA即可檢出。
③試劑盒含內控對照，可防止假陰性的發生。
支原體PCR檢測試劑盒（一步法）適用范圍
科研用戶，細胞上清的篩查可選用MB公司生產的支原體常規PCR檢測試劑盒（一步法）。（詳見下文）
【Venor? Gem OneStep (貨號:11-8050)】或【Venor? Gem Advance (貨號: 11-7096)】
B. 對于需遵循藥典要求的生物制藥企業，可選用MB公司生產的支原體常規PCR檢測試劑盒（經典法）。
【Venor? Gem Classic(貨號: 11-1050) 】+ Taq酶 (貨號: 53-1050)】
或【Venor? Gem Classic (貨號: 11-1050G)】
支原體PCR檢測試劑盒（一步法）特點
1. 內控對照已加在預混液中，無需另外配置，使用便捷。
2.高特異性，僅一條陽性對照條帶，即可涵蓋所有可能感染細胞的支原體物種。
3.操作簡單，易于觀察。
4.高靈敏度，1-5拷貝/μl的支原體DNA即可檢出。
5.歐洲藥典要求的26種支原體均可檢出。該試劑盒可檢測出1種脲原體、7種無膽甾原體和85種支原體。
支原體PCR檢測試劑盒（一步法）操作步驟
下列圖示以Venor? Gem OneStep?支原體?常規PCR?檢測試劑盒?(一步法)( 貨號：11-8050) 為例，具體產品操作以說明書為準。
第1步：樣本處理
第2步：試劑制備
第3步：PCR體系建立
第4步：啟動PCR反應
第5步：電泳結果分析
191bp為內控對照條帶，表明PCR反應正常。
當樣本存在支原體污染時，由于內控對照與支原體DNA存在競爭，內控對照條帶變弱（例如支原體DNA＞10^3拷貝）。
陽性對照中支原體DNA＞10^4拷貝，內控對照條帶會完全消失。
可能在80-90bp存在引物自退火形成的條帶，此條帶不影響檢測結果。
如果待測樣本對PCR產生抑制，則內控對照條帶變弱（和陰性對照相比），此時應先進行DNA抽提（推薦使用：Venor? Gem Sample Preparation Kit 支原體DNA抽提試劑盒），然后再檢測。
儲存條件
2~8℃至少12個月。復溶后必須在-18℃保存。
效期
1年6個月
(締一生物)
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