支原體污染祛除一鍵清空的方法合集來了!支原體污染祛除方法合集 二維碼
發表時間:2022-12-22 14:17作者:締一生物 之前締一生物小編給大家總結了如何判斷在培養過程中,細胞有沒有被支原體污染,今天再來說說如何處理細胞的支原體污染。 由于每個人的實驗以及樣品情況不一樣,所以處理方法也需要分情況討論,給大家簡單列舉幾個場景,便于理解。 情景一:實驗剛開始且細胞不那么貴重 實驗剛剛開始,所用到的細胞也不貴重。培養了幾代發現細胞狀態不對勁,一檢測發現,不幸感染了支原體。對于這種情況,我們的建議是,直接把細胞連同用過的試劑一起丟掉,并對空間和器械進行支原體祛除的處理(后文會將具體方法)。畢竟細胞用的支原體祛除試劑也不便宜,而且需要的時間也不算短,搞科研是個費錢費時間的活,要會精打細算。 處理方法:扔掉樣本并清潔空間和器械 處理難度: 情景二:細胞經過特殊處理不愿放棄 用到的細胞雖然不算特別珍貴,但實驗已經開始一段時間了,傾注了時間和心血的。細胞經歷了轉染或者體外刺激,好不容易擴增起來,好幾盤細胞,難道要一夜回到解放前嗎?當!然!不!可!以! 是時候展示真正的技術了!MB公司Zell Shield?細胞祛除支原體試劑? 按照以下使用說明對細胞進行處理: 1、在每次使用Zell Shield?之前,細胞傳代時,先使用廠家推薦的“懸浮沖洗法”處理好細胞,再使用加了Zell Shield?的培養基養細胞,能達到**的祛除支原體的效果。 廠家推薦的“懸浮沖洗法”(重要!) (1)據研究表明,約98%的支原體存在于細胞表面和細胞間隙。細胞傳代時,用干凈的PBS反復懸浮沖洗,就能把70%以上的支原體沖下來。 (2)支原體直徑遠遠小于細胞直徑。通過低速離心,很容易將細胞和支原體分離,棄上清即可祛除大部分支原體。 2、Zell Shield?常規為-18℃保存,使用前先融化分裝,后續依舊-18℃避光保存,使用時按需融化配置。避免反復凍融。 3、Zell Shield?按1:100濃度可直接加入培養基(例如:500ml培養基中添加5ml Zell Shield?,50mL/瓶的Zell Shield?可供5L培養基使用)。 處理方法:Zell Shield?處理細胞 并清潔空間和器械 處理難度: 情景三:細胞本身就非常珍貴不能丟 有時候會遇到一些特別珍貴的細胞或是病毒樣品,即便是污染了也希望可以拯救一下,減少損失。 針對細胞不同的特性,處理方式也有些許區別: 一、短時間內就要收樣的病毒或細胞樣品: 可以用德國MB公司的Mynox? 對樣本進行快速清除。 它來自枯草芽孢桿菌提取物,可以特異性地與支原體膜結合,改變其通透性,能夠在2-3小時內快速清除支原體,使用方法如下: 二、需要長期培養、保存的樣本: 可以用Mynox? Gold對樣本進行徹底清除。 它是上面Mynox?的升級版,配合自帶的「鞏固防護液」,可以在后續的培養中(約1個月)持續發揮殺滅支原體的作用,并預防支原體生長,適合需要反復傳代、長期保存的珍貴細胞,方法如下: 以上兩種方法搭配支原體環境祛除產品一起使用,消滅支原體更徹底,防止復發! 處理方法:Mynox?或Mynox? Gold 并清潔空間和器械 處理難度: 情景四:環境中的支原體祛除 講真,實驗用的支原體祛除試劑屬實不便宜,為了不給支原體卷土重來的機會,**同時把實驗環境中的支原體也一起消滅(試驗臺、超凈臺、培養箱、液氮罐、移液器),常見的有以下這些方法: 順便用Water Shield?把培養箱和水浴鍋的水槽也一并清潔了,保持水源的潔凈。 處理方法:使用專門的環境用支原體祛除試劑 處理難度: 雖說現在市面上各種各樣的支原體清除產品層出不窮,但避免污染的**方式還是注意實驗規范以及定期清潔,最后希望大家的實驗都順順利利,原理污染。 MB產品最新到貨,包括支原體檢測、祛除相關試劑,可以戳戳鏈接了解詳情:2022海外到貨第七波? 了解更多Ausbian血清和Minerva微生物污染控制試劑,歡迎訪問締一生物官網:www.njjysf.com。 |
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