胎牛血清FBS化凍需要多長(zhǎng)時(shí)間

胎牛血清，簡(jiǎn)稱FBS,很多剛進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的小伙伴都會(huì)好奇胎牛血清fbs化凍需要多長(zhǎng)時(shí)間？畢竟萬(wàn)一出錯(cuò)，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果失敗，那可就闖大禍了！

今天締一生物小編結(jié)合Ausbian血清解凍方法，解答fsb化凍方法。如果是剛到貨的血清，趁著它還凍手，趕緊放進(jìn)-20℃冰箱中，避免反復(fù)凍融。當(dāng)然，如果-80℃冰箱空間充足，把血清儲(chǔ)存進(jìn)去也是沒(méi)有問(wèn)題的。

　　我們都知道，在血清這種混合物中，融化速度：蛋白質(zhì)等干物質(zhì)>水這類溶劑，所以蛋白質(zhì)會(huì)率先溶解析出，而水還是結(jié)成冰的狀態(tài)，導(dǎo)致瓶子中間會(huì)出現(xiàn)一根透明的冰柱，而周圍則會(huì)呈現(xiàn)上黃下紅的分層渾濁液的狀態(tài)，在使用過(guò)程中很容易引起沉淀、混合不均勻、局部濃度過(guò)高等問(wèn)題，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。

　　更重要的一點(diǎn)是，血清中珍貴的生長(zhǎng)因子等活性物質(zhì)，它們?cè)诮鈨鲞^(guò)程中，有著與細(xì)胞復(fù)蘇類似的經(jīng)歷，都需要快速解凍才能盡可能保留生物活性。顯然，4℃過(guò)夜這樣的長(zhǎng)時(shí)間處理，很有可能會(huì)導(dǎo)致一部分「營(yíng)養(yǎng)成分」的損失，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。

　　所以，為了更好地保留血清中的活性成分，使細(xì)胞培養(yǎng)更穩(wěn)定，我們推薦使用三步法溶解，具體方法見(jiàn)下表，有需要的同學(xué)可以截圖保存。

　　如果是儲(chǔ)存在-80℃的血清，則需提前幾天先轉(zhuǎn)移至-20℃冰箱中（至少24小時(shí)），再使用三步法溶解，避免溫差過(guò)大使血清失活。

　　注：此方法國(guó)際通用，適用于所有培養(yǎng)基，在水浴過(guò)程中，血清的平面要完全浸在水中。在融化過(guò)程中要慢慢搖動(dòng)瓶身，使血清混勻，但搖動(dòng)中盡量不要產(chǎn)生泡沫！

　　徹底解凍血清后，可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求，將其分裝，保證每一份夠一次使用量即可，比如：25ml/管、50ml/管等。密封好后趕緊放回-20℃冰箱繼續(xù)儲(chǔ)存。需要配制培養(yǎng)基的時(shí)候，再?gòu)?20℃冰箱中取出一管來(lái)解凍使用（盡量能全部配成培養(yǎng)基，不要有剩余），可以有效避免反復(fù)凍融的問(wèn)題（遵循現(xiàn)用現(xiàn)配、現(xiàn)配現(xiàn)解凍的原則）。配好的培養(yǎng)基可以放到4℃冰箱進(jìn)行儲(chǔ)存。

　　4℃存放時(shí)間

　　看到這里，問(wèn)題又來(lái)了，配好的培養(yǎng)基，或者剩下的那一點(diǎn)點(diǎn)血清，能在4℃冰箱里放多久呢？

　　先給出我們認(rèn)為比較合理的答案，再來(lái)解釋原因：

　　7天

　　一般情況下，已經(jīng)解凍的血清，無(wú)論是配成完全培養(yǎng)基還是在冰箱里備用，都不要超過(guò)一周（7天），原因也很簡(jiǎn)單，存放太久，生長(zhǎng)因子等物質(zhì)容易失活，而且比較容易受到污染，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

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