細胞培養過程中懷疑被支原體污染怎么辦？

如果細胞培養懷疑被支原體污染，可以采取以下措施進行處理：

確認支原體污染：可以通過支原體PCR檢測試劑盒對支原體DNA進行檢測，確認是否存在支原體污染。

清除支原體：如果確認存在支原體污染，可以采用清洗純化法清除支原體。具體方法包括細胞營養馴化、優質細胞群的篩選、細胞清洗、反復離心洗滌等步驟。

限制使用的要求：若無法避免使用可能受到支原體污染的細胞系，可以采用限制使用的方式，**程度減少污染的范圍和影響。這可以通過降低細胞傳代次數來實現，細胞傳代次數越少，支原體的繁殖和擴散機會就越少。

加強設備管理：使用過的培養瓶、培養液和細胞等應立即丟棄，并進行消毒處理。細胞房環境要做全面的消殺，以及人員手部等防止二次污染！

防止交叉污染：在細胞培養過程中，必須嚴格遵守無菌操作規程，避免交叉污染。無菌操作包括但不限于穿戴專門的工作服和鞋子，對所有實驗器具進行消毒，以及在實驗前后對實驗室進行徹底的清潔和消毒。

其他方法：如紫外線照射、高溫滅菌、添加抗生素等也可以有效地消除支原體污染。但是，這些方法都有一定的局限性，需要根據具體情況進行選擇和應用。

總之，如果懷疑細胞培養被支原體污染，應采取一系列措施進行處理，包括確認污染、清除支原體、限制使用、加強設備管理和防止交叉污染等。同時，也應采取其他方法進行預防和治療。

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支原體熒光定量PCR 法(gPCR） : 是在常規 PCR 基礎上，將 [針對支原體特異性保守序列的探針，做熒光標記，使 PCR 擴增后的產物帶有熒光，利用熒光信號的變化和配套軟件，進行 DNA 擴增反應的實時監測，簡稱gPCR。