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動物源培養基Yes or Not？

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發表時間：2022-11-09 17:17

　　多數情況下，動物細胞的體外培養均依賴動物血清而生長，脫離血清，細胞將無法生長。目前，使用較多的是各類牛血清，例如：胎牛血清、新生牛血清、小牛血清、成牛血清等，也有一些細胞培養會用到馬血清。

　　但也有研究人員認為，細胞培養基中的牛血清，可能存在一定外源異種物質污染的風險，臨床中使用的生物制品中如果有牛血清的殘留，還有可能會引起過敏等反應。

　　于是無動物源成分培養基(Serum-Free Media)便應運而生。其中添加了血清中所含有的已知成分：粘附因子、生長因子、必需的營養物質和激素等，還有一些蛋白來源于重組蛋白或者蛋白水解物。能在一定程度上模擬血清的功能，幫助細胞生長。但無血清培養基中所能添加的因子有限，不能100%還原血清成分，因此對于細胞的保護和支持都不如含有血清的培養基。

　　那么在細胞培養過程中，含動物源成分培養基與無動物源性培養基到底該如何選擇？本期內容，就來盤點這二者的優缺點，希望對小伙伴們選擇培養基或是血清提供幫助。

　　文章篇幅較長，目錄已經搭好，供大家預覽！

　　★ 目錄 ★

　　一含動物源成分培養基

　　二無動物源成分培養基

　　三動物源VS非動物源該如何選擇？

　　一、含動物源成分培養基

　　1、典型代表：血清

　　這里以血清為典型動物源成分為代表。

　　血清的本質是血液或血漿經過凝血處理（血小板激活）后，再經過濾等處理所得到的上清液。有學者認為，血清中含有血小板激活后釋放的各種生長因子，因此可以支持多種細胞生長。

　　2、含血清培養基優勢

　　（1）含動物源成分，如血清，提供基本營養物質：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等，是細胞生長必需的物質。

　　（2）提供激素和各種生長因子：胰島素、腎上腺皮質激素（氫化可的松、地塞米松）、類固醇激素（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。

　　（3）提供結合蛋白：結合蛋白作用是攜帶重要的低分子量物質，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激素等，轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋白在細胞代謝過程中起重要作用。

　　（4）提供促接觸和伸展因子使細胞貼壁免受機械損傷。

　　（5）對培養中的細胞起到某些保護作用：有一些細胞，如內皮細胞、骨髓樣細胞可以釋放蛋白酶，血清中含有抗蛋白酶成分，起到中和作用。這種作用是偶然發現的，現在則有目的的使用血清來終止胰蛋白酶的消化作用。因為胰蛋白酶已經被廣泛用于貼壁細胞的消化傳代。血清蛋白形成了血清的粘度，可以保護細胞免受機械損傷，特別是在懸浮培養攪拌時，粘度起到重要作用。血清還含有一些微量元素和離子，他們在代謝解毒中起重要作用，如硒等。

　　3、含動物源成分培養基不足

　　人用或獸用藥物生產過程中，血清中不明成分，作為異源物質，可能會引起人或動物的免疫/排異反應。

　　二、無動物源成分培養基

　　1、無動物源成分培養基

　　基于生產藥物的安全考慮，培養基中的添加組分無動物來源，需要的蛋白來源于重組蛋白或者蛋白水解物，這些組分可以保障細胞生長及增殖的需要。后來又衍生出完全不用動物來源的蛋白（但有來自于植物蛋白的水解片段，或合成多肽片段等其他衍生物等部分添加物）的培養基。

　　2、無動物源成分培養基優勢

　　避免所生產的藥物，因動物源成分而產生的毒性。

　　3、無動物源成分培養基不足

　　（1）無法為細胞提供保護作用：細胞在無血清培養基中易受某些機械因素和化學因素的影響。

　　（2）部分產品成本較高，保存條件要求嚴格。

　　（3）具有高度特異性：一種無血清培養基僅適合某一類細胞的培養。處于發育的不同分化階段的細胞(例如干細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方，對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。

　　（4）容錯性較差：而且在去除血清的同時，也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用，因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。