破解細胞生長慢，這幾個關鍵點你注意了嗎？（下）

　　上期內容，我們聊了聊可能導致細胞生長緩慢的3個因素：污染、培養體系不完善、細胞初始狀態差。

　　今天我們書接上回，接著講講另外3個關鍵點。

       公共設備可能存在問題

　　儀器的參數

　　也會影響細胞狀態

　　如果細胞不存在污染，培養體系沒有瑕疵、細胞初始狀態也沒有問題，那么可以考慮公共儀器設備是否存在紕漏。

　　最常見有水浴鍋溫度、室內溫度及濕度、培養箱參數、水浴鍋溫度等。

　　水浴鍋是細胞培養室常用的儀器，要定期用溫度計對其工作溫度進行檢查，觀察是否存在溫度不準、溫度驟變的情況。另外要強調一點，水浴鍋也是常見的污染源之一，水浴鍋中的水**使用無菌水，并定期做好清潔工作，推薦大家使用MB WaterShield，可以有效清除、預防水槽中的支原體，方便安全、省時省力省心。

　　細胞實驗室的溫度及濕度：儀器還是操作對溫度沒有特殊要求，維持舒適的溫度即可，比如18~26℃；過高的濕度會導致微生物的滋生，所以建議正常維持濕度在70%以下。應定期用溫度濕度測試儀對細胞實驗室進行檢測，以防溫控系統出現故障。

　　培養箱參數：一般哺乳類與禽類細胞在體外培養的適宜溫度是37～38℃；大多數細胞適宜的pH范圍往往是7.2～7.4。在開放式培養中，以5%的二氧化碳氣體比例為宜。但在實際操作過程中，細胞培養箱有可能會出現以下故障，影響細胞培養體系，進而使細胞生長變得緩慢：

　　溫度和溫度設定不準；

　　細胞培養箱濕度不能維持；

　　細胞培養箱的二氧化碳濃度不準。

　　對應解決方法給大家整理好，建議大家保存，以備不時之需。

       實驗人員可能發生變化

       細胞“飼養員”的更換

　　也可能影響細胞生長速率

　　作為一名合格的細胞“飼養員”，一定要預先了解所養細胞的“習性”：用哪種培養法、使用何種類型培養體系（血清種類、基礎培養基類型、是否添加生長因子以及抗生素等），盡可能還原初始的培養環境，讓細胞有個適應的過程。另外，實驗者自身也要注意操作規范，按照標準流程培養。

　　實驗試劑可能發生改變

　　培養用的試劑

　　也可能會是影響因素

　　不同品牌的試劑可能會有些許差別，對于一些比較嬌貴的的細胞，這些細微的差別很可能會導致細胞生長受到影響。因此我們一直強調大家“追本溯源”，盡可能用與原來一致的培養條件。

　　如果要更換試劑，建議大家先做個對照試驗，看看新的試劑對細胞生長有沒有影響。

　　另外，除了以上這六點，還有一點需要特別注意，就是：

　　細胞的代次

　　一般來說，細胞傳代次數是一定的（一些癌細胞系屬于特例），特別是像間充質干細胞這類對代次比較敏感的細胞，需要格外注意，傳代次數過高后（10-15代左右），細胞生長速率也會明顯減慢。在實驗時，盡量選擇代次較低且狀態穩定的細胞。

　　所有關于影響細胞生長的可能原因，就給大家總結到這里啦，如果你還有新發現，歡迎補充！

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