貼壁細胞形態不好或狀態差怎么辦?

對于貼壁細胞，如果細胞形態不好，(或者細胞形態不清晰，表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:

倒掉舊的培養基，加入3mIPBS洗滌一次用滴管吸走，然后再加入3ml的 PBS進行預吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過一遍，然后吸走。這時候再開始正式的消化、吹打。

其次，把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養瓶內，培養瓶事先加入培養基，放入培養箱內培養，按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個時間點，已經有部分細胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺，底面朝上迅速倒出其中的培養基，加入3ml新培養基再輕輕洗一次。

然后，加入10％胎牛血清配比的培養基培養。后續觀察細胞生長情況以及形態，如果一次效果還不理想，可重復多次，直到找到細胞完美形態。其中要注意結合細胞喜歡的生長情況,對于有密度依賴性的細胞，等貼壁細胞比較多點的時候再傳傳代，反之亦然。

對于懸浮細胞，如果細胞培養過程中有較多死細胞或細胞碎片，可將細胞吹散后用離心管收集離心，離心后沉淀分為兩層，活細胞處于上層，死細胞和細胞碎片處于下層，呈白色。去上清，加入新鮮培養基將上層細胞輕輕吹打混勻(不要用力過猛，從而將細胞碎片吹散)，再將細胞懸液接種至新的培養瓶，放入培養箱繼續培養。