支原體又稱霉形體，支原體缺乏細(xì)胞壁，大小介于細(xì)菌與病毒兩者之間，能通過(guò)濾菌器，在無(wú)生命培養(yǎng)基上有強(qiáng)大的繁殖能力，是現(xiàn)在最小的原核細(xì)胞型微生物。對(duì)科研實(shí)驗(yàn)室和生物制品工廠在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中特別容易受到支原體污染，有很多文獻(xiàn)報(bào)道稱，支原體污染在儲(chǔ)存細(xì)胞系中發(fā)生率約為15-35%，在生物制藥行業(yè)中約為0.44-6.70%。
細(xì)菌和真菌污染相對(duì)較容易檢測(cè)、預(yù)防和去除，但支原體造成的污染卻很難察覺(jué)，即使生長(zhǎng)密度高達(dá)107-109CFU/ml，也很難有污染跡象（比如溶液渾濁、pH變化等）。支原體污染后能導(dǎo)致細(xì)胞產(chǎn)生多種變化：細(xì)胞死亡、抑制細(xì)胞生長(zhǎng)、改變新陳代謝、改變細(xì)胞膜抗原性、染色體畸變、干擾核酸的合成、改變轉(zhuǎn)染的效率、抑制病毒的生產(chǎn)。德國(guó)Minerva Biolabs GmbH 公司在細(xì)胞培養(yǎng)和生物制藥領(lǐng)域的支原體、細(xì)菌和病毒污染控制收全球科研人好評(píng)，有完整的解決支原體問(wèn)題的試劑，包括：支原體檢測(cè)系列、支原體清除（培養(yǎng)箱、水浴鍋、超凈臺(tái)和細(xì)胞房）、細(xì)胞支原體清除和支原體預(yù)防相關(guān)系列。
一、支原體DNA提取試劑盒
二、支原體檢測(cè)試劑盒
（一）常規(guī)PCR方法
（二）熒光定量PCR(qPCR)方法
二、方法驗(yàn)證用支原體標(biāo)準(zhǔn)品（替代藥典方法需要驗(yàn)證）
（一）靈敏度驗(yàn)證用標(biāo)準(zhǔn)品
（二）支原體基因組DNA（拷貝數(shù)已標(biāo)定）
（三）支原體基因組DNA（特異性驗(yàn)證用）
三、方法驗(yàn)證輔助產(chǎn)品
四、支原體祛除
一、細(xì)胞支原體祛除劑
Zell Shield?支原體祛除劑（培養(yǎng)基用）? 英文名：Zell Shield?
品牌：德國(guó)MB1. 適用范圍
（1）細(xì)胞已發(fā)生支原體污染，但又不愿丟棄，希望繼續(xù)培養(yǎng)（如已轉(zhuǎn)染或大量擴(kuò)增的細(xì)胞）。
（2）初始培養(yǎng)的原代細(xì)胞。
（3）存在支原體污染高風(fēng)險(xiǎn)的細(xì)胞。
2. 用法：
（1）1:100加入培養(yǎng)基。
（2）當(dāng)細(xì)胞存在支原體污染時(shí)，應(yīng)先對(duì)細(xì)胞懸浮沖洗三次，再用含Zell Shield?培養(yǎng)基培養(yǎng)。每次傳代前都應(yīng)做懸浮沖洗處理。連續(xù)傳代4次，支原體即可祛除。
Mynox? Gold支原體祛除劑（珍貴細(xì)胞保種用）? 英文名：Mynox? Gold
品牌：德國(guó)MB1. 適用范圍
被支原體污染的珍貴細(xì)胞或不易獲得的生物樣本（如細(xì)胞種子）。
2. 用法：
步驟1. 將「治療液」加入到4.5ml培養(yǎng)基（FBS需≤5%）中，培養(yǎng)細(xì)胞（細(xì)胞數(shù)為104~105）。
步驟2. 細(xì)胞長(zhǎng)至80%-90%匯合時(shí)，細(xì)胞傳代。將1管「鞏固防護(hù)液」加到9.5ml培養(yǎng)基中，用該培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
步驟3. 重復(fù)步驟2，細(xì)胞再傳代2次，支原體即完全祛除。
注意：每次傳代時(shí)，**都能把細(xì)胞懸浮沖洗三次，可取得更好的治療效果
Mynox支原體祛除劑（珍貴樣本用）? 英文名：Mynox?
品牌：德國(guó)MB1. 適用范圍
被支原體污染的珍貴細(xì)胞、不易獲得的生物樣本或病毒收獲液（特別是不能長(zhǎng)期培養(yǎng)的樣品）。
2. 用法：
（1）對(duì)于貼壁細(xì)胞：
步驟1. 培養(yǎng)皿中加入200μl Mynox?和 2.8ml培養(yǎng)基中（FBS≤5%），混勻。
步驟2. 再加入2ml細(xì)胞（細(xì)胞數(shù)為104~105，培養(yǎng)基中的FBS需≤5%）。
步驟3. 細(xì)胞培養(yǎng)2小時(shí)，棄上清，換用新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)4代即可。
（2）對(duì)于懸浮細(xì)胞：
步驟1. 在離心管中加入200μl Mynox?和1.6ml胰酶（0.125 %，5 mM EDTA in PBS），混勻。
步驟2. 加入1.6ml細(xì)胞（細(xì)胞數(shù)為104~105）。
步驟3. 室溫靜置30min。
步驟4. 600×g離心5min。棄上清，換用新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)4代即可。10-02002管/盒
二、工作區(qū)域中支原體的祛除
品名用途和用法貨號(hào)規(guī)格
MB支原體祛除噴霧? 英文名：Mycoplasma-OffTM
品牌：德國(guó)MB用途：實(shí)驗(yàn)環(huán)境（如實(shí)驗(yàn)臺(tái)、超凈臺(tái)、培養(yǎng)箱、儀器設(shè)備）、無(wú)菌車間和潔凈生產(chǎn)線的支原體的祛除，對(duì)清除支原體、細(xì)菌、真菌（含真菌孢子）和多種病毒污染均有效。
2. 用法：噴霧劑噴灑待消毒的表面，等待5-10min后，用干凈紙巾擦拭。通風(fēng)2-3分鐘。
MB支原體祛除濕巾? 英文名：Mycoplasma-OffTM Wipes
品牌：德國(guó)MB1. 用途：應(yīng)用于電子設(shè)備、門把手、電話、移液器表面的支原體的祛除，對(duì)支原體、細(xì)菌、真菌（含真菌孢子）和多種病毒均有效。
用法：用濕巾擦拭后，應(yīng)讓被消毒物體的表面保持濕潤(rùn)，再讓其自然風(fēng)干。
三、培養(yǎng)箱水槽、水浴鍋中支原體的預(yù)防
支原體祛除劑（水槽用）? 英文名：Water ShieldTM
品牌：德國(guó)MB
1. 用途：預(yù)防培養(yǎng)箱水槽、水浴鍋的支原體、細(xì)菌和真菌污染。
2. 用法：
步驟1. 本品按1:200比例加入到蒸餾水中，如1L蒸餾水+5ml Water ShieldTM
步驟2. 加入Water ShieldTM的蒸餾水可直接加入到培養(yǎng)箱水槽或水浴鍋中，
步驟3. 4周左右清洗水槽，換水，重新加入Water ShieldTM。
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