如何預(yù)防PCR實(shí)驗(yàn)室中的氣溶膠污染呢

為了預(yù)防PCR實(shí)驗(yàn)室中的氣溶膠污染，需要采取一系列綜合措施。以下是具體的預(yù)防措施，按照清晰的分點(diǎn)進(jìn)行歸納：

實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)與分區(qū)：

建設(shè)獨(dú)立的PCR專用實(shí)驗(yàn)室，確保實(shí)驗(yàn)室的封閉性和獨(dú)立性。

按試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本制備區(qū)、擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)進(jìn)行嚴(yán)格分區(qū)，將低污染風(fēng)險(xiǎn)操作和高污染風(fēng)險(xiǎn)操作在空間上隔離開來。

實(shí)驗(yàn)室應(yīng)分為潔凈區(qū)、污染區(qū)、緩沖區(qū)等，明確各區(qū)功能及物品流向，降低氣溶膠污染風(fēng)險(xiǎn)。

通風(fēng)與空氣凈化：

打造專門的負(fù)壓通風(fēng)系統(tǒng)，控制實(shí)驗(yàn)室空氣從低風(fēng)險(xiǎn)區(qū)向高風(fēng)險(xiǎn)區(qū)單向流動(dòng)，避免保存試劑被一次性全部污染。

使用高效過濾器、紫外線燈等設(shè)備進(jìn)行空氣凈化，降低氣溶膠濃度。

實(shí)驗(yàn)室管理：

制定嚴(yán)格的實(shí)驗(yàn)室管理?xiàng)l例，控制人員物品單向流動(dòng)。

抬高實(shí)驗(yàn)人員門檻，確保操作人員經(jīng)過上級單位規(guī)范培訓(xùn)、考核并獲得“PCR上崗證”。

嚴(yán)格控制進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室人員，實(shí)驗(yàn)無關(guān)人員不得隨意進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室。

操作規(guī)范：

在實(shí)驗(yàn)過程中使用生物安全柜，可有效捕獲和過濾實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的氣溶膠。

盡量減少在實(shí)驗(yàn)區(qū)內(nèi)不必要的走動(dòng)以減少交叉污染的可能性。

試劑準(zhǔn)備區(qū)（配液區(qū)）是潔凈級別要求最高的區(qū)域，**在超凈工作臺中進(jìn)行操作。

擴(kuò)增反應(yīng)區(qū)廢液不能在實(shí)驗(yàn)室中傾倒，必須經(jīng)消毒液浸泡消毒后在遠(yuǎn)離實(shí)驗(yàn)室的地方棄掉。

個(gè)人防護(hù)：

要求操作人員全程嚴(yán)格進(jìn)行360度無死角全身防護(hù)，穿戴防護(hù)服、口罩、手套等個(gè)人防護(hù)裝備。

實(shí)驗(yàn)的過程中選擇最合適尺寸的手套并能及時(shí)更換，在進(jìn)出不同實(shí)驗(yàn)區(qū)域或進(jìn)行模板操作后都必須更換手套。

試劑與耗材管理：

PCR反應(yīng)液分裝保存，減少重復(fù)加樣次數(shù)，降低試劑被污染風(fēng)險(xiǎn)。

實(shí)驗(yàn)室自配試劑（去離子水、緩沖液等）和所有使用器具在使用之前均應(yīng)高壓滅菌或紫外殺菌。

移液器吸頭、反應(yīng)管等實(shí)驗(yàn)耗材應(yīng)一次性使用。

監(jiān)測與質(zhì)控：

在PCR試驗(yàn)中加入內(nèi)標(biāo)、陰陽性對照等質(zhì)控，監(jiān)測檢測結(jié)果，避免出現(xiàn)假陰性或假陽性。

實(shí)驗(yàn)室消毒：

定期對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行消毒處理，包括實(shí)驗(yàn)設(shè)備、實(shí)驗(yàn)器材、地面等，使用有效的消毒劑如75%乙醇、含氯消毒劑和核酸去除劑等。

培訓(xùn)與應(yīng)急預(yù)案：

加強(qiáng)實(shí)驗(yàn)人員對氣溶膠污染的認(rèn)識和防控技能培訓(xùn)，提高實(shí)驗(yàn)室管理水平。

制定PCR實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染應(yīng)急預(yù)案，確保一旦發(fā)生污染，能迅速啟動(dòng)應(yīng)急預(yù)案，確保實(shí)驗(yàn)室安全。

通過以上綜合措施的實(shí)施，可以有效預(yù)防PCR實(shí)驗(yàn)室中的氣溶膠污染，保障實(shí)驗(yàn)室的安全和實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。