細(xì)胞培養(yǎng)中培養(yǎng)箱支原體污染怎么辦

當(dāng)培養(yǎng)箱發(fā)生支原體污染時(shí)，應(yīng)采取以下措施來確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可靠性，同時(shí)維護(hù)實(shí)驗(yàn)室的整體環(huán)境衛(wèi)生：

判斷污染：

通過定期的培養(yǎng)物檢測(cè)、PCR檢測(cè)等方法來確認(rèn)細(xì)胞是否已被支原體污染。

隔離污染源：

一旦確定培養(yǎng)箱受到支原體污染，應(yīng)立即將其從其他無污染的培養(yǎng)箱和實(shí)驗(yàn)區(qū)域中隔離，以避免交叉感染。

停止使用并清理：

立即停止使用受污染的培養(yǎng)箱，并將其中的培養(yǎng)物和培養(yǎng)基予以正確處置。

如果培養(yǎng)箱內(nèi)有明顯的可移動(dòng)污染物，如污染的培養(yǎng)皿、試管等，也要及時(shí)清理和處置。

徹底清潔和消毒：

對(duì)受污染的培養(yǎng)箱進(jìn)行徹底的清潔和消毒。

使用含有有效消毒劑的擦拭布或棉球，仔細(xì)擦拭培養(yǎng)箱的內(nèi)外表面、門、通風(fēng)孔等部位，確保消毒液能夠覆蓋到所有可能存在支原體的區(qū)域。

可以考慮使用如德國(guó)MB公司生產(chǎn)的支原體祛除噴霧——Mycoplasma Off，以及在培養(yǎng)箱水槽中加入Water Shield，這些產(chǎn)品可以高效清除并預(yù)防支原體污染。

驗(yàn)證消毒效果：

在進(jìn)行下一次實(shí)驗(yàn)之前，必須驗(yàn)證培養(yǎng)箱的消毒效果。

使用培養(yǎng)基或其他適當(dāng)?shù)臋z測(cè)方法，確認(rèn)培養(yǎng)箱內(nèi)不再存在支原體污染。

只有在驗(yàn)證消毒效果合格后，才能重新投入使用。

采取預(yù)防措施：

為了防止支原體污染的再次發(fā)生，建議采取一系列預(yù)防措施，如：

定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室環(huán)境進(jìn)行消毒。

加強(qiáng)操作人員的培訓(xùn)，確保他們了解并遵循正確的操作流程。

對(duì)培養(yǎng)箱進(jìn)行定期維護(hù)保養(yǎng)，以確保其正常運(yùn)行和防止污染。

支原體清除方法：

如果沒有無支原體的培養(yǎng)箱可用，可以考慮從被侵染的細(xì)胞中清除支原體。清除方法主要有：

物理方法：如熱激和光敏。

化學(xué)方法：如用氯仿清洗，或者用含6-MPDR的培養(yǎng)基培養(yǎng)。

免疫方法：用特異性抗支原體抗體的血清。

化學(xué)療法：在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基或者瓊脂糖培養(yǎng)基上加入抗生素，如喹諾酮和四環(huán)素等，這些試劑可以抑制支原體核酸和蛋白質(zhì)的合成，有效清除支原體。

通過以上措施的實(shí)施，可以確保培養(yǎng)箱支原體污染得到及時(shí)有效的處理，保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，同時(shí)維護(hù)實(shí)驗(yàn)室的整體環(huán)境衛(wèi)生。