藥典支原體檢測方法

藥典支原體檢測方法

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發表時間:2024-04-22 16:37

藥典中規定的支原體檢測方法主要包括以下幾種:

分離培養法:這是支原體檢測的金標準方法,其檢測精確度最高。這種方法是從可疑的細胞培養體系中取樣,并接種到最適宜支原體生長的瓊脂平板上。如果樣本中含有支原體,它們會在這種瓊脂平板上生長,最終形成明顯可見的特征性菌落。但這種方法存在兩個主要缺點:一是檢測時間太長,支原體要長出明顯克隆至少需要4周時間;二是盡管可以檢測絕大多數支原體種類,但對于某些特定類型的支原體,如M. hyorhinis,這種方法可能無法有效檢測。

DNA檢測法:也稱為指示細胞法,該方法主要依賴于支原體的DNA特性。大多數支原體的DNAAT堿基的含量較高,特定的DNA熒光染料可以結合到這些DNA鏈上。當指示細胞被支原體感染后,這些染料會使支原體核酸著色,從而在細胞膜或培養基等處發現熒光,從而確定支原體的存在。

PCR法:這是目前最常用的支原體檢測方法,其檢測方式包括凝膠電泳檢測和熒光定量檢測。該方法在支原體16S rRNA基因的保守區設計引物,通過檢測支原體DNA來檢測細胞中有無支原體的污染。PCR法的優點是檢測靈敏度高,特異性好,檢測速度快。

化學發光法:這種方法利用支原體內特有的酶與提供的底物相互作用,使其中的ADP轉化為ATP,熒光素酶可以利用產生的ATP與熒光素酶底物發生反應,產生可檢測到的光,從而判斷支原體的存在。

請注意,不同的檢測方法各有優缺點,應根據實際情況選擇最適合的方法進行支原體檢測。同時,這些檢測方法都需要在嚴格的實驗條件下進行,以確保檢測結果的準確性。

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