實時熒光定量PCR和qPCR之間的區(qū)別是什么

實時熒光定量PCR和qPCR之間的區(qū)別

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發(fā)表時間:2024-04-07 15:32

實時熒光定量PCRQuantitative Real-time PCR)和qPCR實際上是同一種技術(shù)的不同稱謂,它們之間沒有本質(zhì)的區(qū)別。實時熒光定量PCR是一種在DNA擴增反應(yīng)中,以熒光化學物質(zhì)測每次聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)循環(huán)后產(chǎn)物總量的方法,用于對PCR進程進行實時檢測。這種技術(shù)通過內(nèi)參或者外參法對待測樣品中的特定DNA序列進行定量分析。

實時熒光定量PCR的原理是在PCR擴增過程中,通過熒光信號的變化實時檢測每一個循環(huán)擴增產(chǎn)物的量的變化,并進行定量分析。這種技術(shù)通過在反應(yīng)體系中加入熒光探針或熒光染料,實時監(jiān)測熒光信號的變化,從而計算出目標分子的拷貝數(shù)。

因此,實時熒光定量PCRqPCR是同一技術(shù)的不同表述,它們都是用于核酸檢測和定量分析的金標準,主要應(yīng)用于DNAcDNA的定量分析,如基因表達分析、病毒載量檢測等。如需了解更多信息,可以查閱生物學、分子生物學或相關(guān)領(lǐng)域的專業(yè)書籍和文獻。

德國MB公司生產(chǎn)的支原體qPCR檢測試劑盒(均為探針法檢測),依據(jù)操作步驟的細微差別, 分『經(jīng)典法』和『一步法』兩種。   

此兩類試劑盒較全球其他廠家同類產(chǎn)品,具有以下獨特的優(yōu)點:

①經(jīng)典法qPCR試劑盒遵循歐洲藥典流程要求

②高特異性,一次檢測即可涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種(涵蓋歐洲藥典規(guī)定的9種支原體),根據(jù)序列一致性,至少可以檢測到107種支原體物種。操作簡單,易于觀察(使用MB的試劑盒,下表中列出的支原體物種均為陽性,其他微生物或真核細胞均為陰性,無交叉反應(yīng))。


③高靈敏度,MB公司的支原體qPCR檢測試劑盒經(jīng)典法最低檢測限可達到≤10CFU/ml。

MB公司的支原體qPCR檢測試劑盒一步法最低檢測限≥50個基因組/反應(yīng)。

④MB公司有相應(yīng)配套的10CFU/100CFU的敏感度測試的標準品,便于方法學驗證。

MB公司有相應(yīng)配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA,便于特異性驗證。

MB公司有相應(yīng)配套的支原體絕對定量標準品,便于最后定量檢測。



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