支原體檢驗方法學驗證步驟

支原體檢驗方法學驗證主要包括以下幾個步驟：

實驗原理驗證：確認所選支原體檢驗方法的原理是否可靠，是否經過充分驗證，并具有較高的敏感性和特異性。

試劑和耗材驗證：對所使用的試劑和耗材進行驗證，確保其質量和適用性。特別注意試劑和耗材的儲存和使用條件，以及其有效期。

樣本收集和制備：驗證樣本的收集和制備方法，確保樣本的代表性和可靠性。同時，注意樣本的保存和運輸條件，避免污染和交叉污染。

陽性陰性結果判定：驗證陽性結果和陰性結果的判定標準，并確定臨界值。可以采用已知陽性樣本和陰性樣本進行驗證，以確認結果的準確性。

重復性和穩定性驗證：對所選支原體檢驗方法的重復性和穩定性進行驗證，以評估其可重復性和可靠性。可以采用多個樣本進行重復檢測，并計算檢測結果的變異系數（CV）等指標。

參考標準對比：將所選支原體檢驗方法與參考標準進行對比，以評估其準確性和可靠性。參考標準可以是國際或國內公認的方法或標準品。

臨床應用評估：在實際應用中評估所選支原體檢驗方法的準確性和可靠性，并與臨床診斷結果進行比較，以確定其臨床應用價值。

數據分析和解讀：對驗證結果進行統計和分析，解讀各項指標的意義和優劣，并根據結果優化所選支原體檢驗方法。

總之，支原體檢驗方法學驗證是一個系統的過程，需要從多個方面對所選方法進行評估和驗證。

德國MB公司生產的支原體qPCR檢測試劑盒（均為探針法檢測），依據操作步驟的細微差別， 分『經典法』和『一步法』兩種。   

此兩類試劑盒較全球其他廠家同類產品，具有以下獨特的優點：

①經典法qPCR試劑盒遵循歐洲藥典流程要求

②高特異性，一次檢測即可涵蓋了所有可能感染細胞的支原體物種（涵蓋歐洲藥典規定的9種支原體），根據序列一致性，至少可以檢測到107種支原體物種。操作簡單，易于觀察（使用MB的試劑盒，下表中列出的支原體物種均為陽性，其他微生物或真核細胞均為陰性，無交叉反應）。

③高靈敏度，MB公司的支原體qPCR檢測試劑盒經典法最低檢測限可達到≤10CFU/ml。MB公司的支原體qPCR檢測試劑盒一步法最低檢測限≥50個基因組/反應。

④MB公司有相應配套的10CFU/100CFU的敏感度測試的標準品，便于方法學驗證。

⑤MB公司有相應配套的支原體基因組DNA和細菌基因組DNA，便于特異性驗證。

⑥MB公司有相應配套的支原體絕對定量標準品，便于最后定量檢測。