牛血清之特殊加工工藝血清,您知道幾種?牛血清之特殊加工工藝血清 二維碼
發(fā)表時間:2023-12-21 14:49 牛血清可通過牛齡進(jìn)行分類,可大致分為:胎牛血清(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS)、新生牛血清(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS,或稱小牛血清)、成年牛血清(Adult Bovine Serum,簡稱ABS)。 不同牛齡血清所含的促細(xì)胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質(zhì)等組分與比例不同。 但這幾種血清也不一定可以滿足所有實驗要求,那么就出現(xiàn)了一些根據(jù)實驗要求進(jìn)行了特殊加工的胎牛血清。譬如透析胎牛血清、碳吸附胎牛血清、去外泌體胎牛血清、四環(huán)素調(diào)控系統(tǒng)胎牛血清、低IgG胎牛血清、去脂胎牛血清等。 今天我們就來聊一聊其中的一種:透析胎牛血清 常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)需要添加血清來維持細(xì)胞的增殖能力,盡管血清可以滿足一般細(xì)胞培養(yǎng)需求,但在進(jìn)行營養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)記特定成分進(jìn)行研究的實驗中,仍需要去除某些特定的成分,常用的去除方法有透析。透析是將血清循環(huán)通過中空纖維,并在血清中補(bǔ)充生理鹽水以維持滲透壓,移除分子量小于10,000Da的小分子,如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白等。因此透析胎牛血清主要用于關(guān)注小分子濃度的特殊研究,包括:研究蛋白質(zhì)組學(xué),同位素標(biāo)記、細(xì)胞信號傳導(dǎo)和報告基因分析、報告基因細(xì)胞系的篩選等。 細(xì)胞培養(yǎng)條件下穩(wěn)定同位素標(biāo)記技術(shù)(簡稱SILAC) 這是一項以質(zhì)譜為基礎(chǔ)的定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù),全稱為Stable isotope labeling with amino acids in cell culture (SILAC)。它將13C或15N標(biāo)記的氨基酸摻入到培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞,來標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)新合成的蛋白質(zhì),一般培養(yǎng)5-6代,細(xì)胞中的蛋白質(zhì)將都被同位素標(biāo)記。然后質(zhì)譜分析,即可比較經(jīng)過不同處理的細(xì)胞,其內(nèi)部蛋白質(zhì)豐度的變化。它還可用于正常細(xì)胞與病理狀態(tài)細(xì)胞二者的比較。為避免胎牛血清中天然氨基酸的干擾,這時就需要用到透析胎牛血清,以保證摻入細(xì)胞蛋白中的氨基酸均為標(biāo)記氨基酸(常采用賴氨酸或精氨酸)。 工程細(xì)胞株的篩選 以常見的工程細(xì)胞株CHO-DFGRˉ為例,該細(xì)胞自身缺乏二氫葉酸還原酶(DHFR),必須在添加了次黃嘌呤、胸腺嘧啶和甘氨酸的培養(yǎng)液中才能得以存活。如將含有目的基因與DHFR基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染細(xì)胞,則可以得到在不含上述添加劑的培養(yǎng)基上也能生長的細(xì)胞克隆。通過甲氨蝶呤(MTX)進(jìn)一步篩選,可進(jìn)一步得到能表達(dá)大量目的蛋白的細(xì)胞克隆。這時的胎牛血清由于不含有次黃嘌呤和胸腺嘧啶等,也常作為選擇培養(yǎng)基的一部分,參與陽性轉(zhuǎn)染細(xì)胞克隆的篩選。 研究某些因子如核苷酸或微量元素如硒、鋅對某種類型細(xì)胞增殖、分化的影響。這時也需要用透析胎牛血清,以避免培養(yǎng)體系中天然存在的這些物質(zhì)的干擾。 北京締一生物科技有限公司國內(nèi)總代理的Ausbian 品牌 Ausbian透析胎牛血清 Ausbian Fetal Bovine Serum, Dialyzed Ausbian透析胎牛血清產(chǎn)品說明: 采用Ausbian進(jìn)口特級胎牛血清,透析過濾去除10000D以下小分子(如次黃嘌呤和胸腺核苷),避免外源小分子對細(xì)胞產(chǎn)生干擾。適合脈沖示蹤實驗(例如同位素標(biāo)記特定小分子,并加入到培養(yǎng)體系中,以研究細(xì)胞代謝),也適合轉(zhuǎn)染CHO后的篩選等應(yīng)用。 Ausbian透析胎牛血清描述 1. 精選內(nèi)毒素更低批次,細(xì)胞更健康。 2.每個批次提供完整的檢測報告。 3.全程冷鏈運(yùn)輸,不出現(xiàn)凍融現(xiàn)象,保證質(zhì)量不受影響。 4.100ml,500ml多種包裝選擇,適合不同實驗用量需求。 5.國內(nèi)現(xiàn)貨儲備,避免國際貨運(yùn)風(fēng)險。 Ausbian透析胎牛血清儲存條件 -20°C凍存。 胎牛血清解凍后,應(yīng)按單次習(xí)慣用量分裝,分裝后的血清仍-20°C凍存。 若置于4°C的血清,應(yīng)在一周內(nèi)用完。 為保證更好的細(xì)胞培養(yǎng)效果,血清和培養(yǎng)基的配制,應(yīng)遵循“現(xiàn)用現(xiàn)配”原則。配好的培養(yǎng)液,應(yīng)于一周內(nèi)用完。 血清避免反復(fù)凍融,避免在4°C或更高溫度儲存過久,否則會破壞血清中有效活性成分,影響血清品質(zhì)。 |
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