如何選擇PCR熱啟動Taq酶？

目前國內市場上銷售的熱啟動Taq酶的品牌很多，但真正高質量的熱啟動Taq酶并不多，面對這么多的熱啟動Taq酶產品，我們應如何選擇？

選擇擴增效率高的熱啟動Taq酶

耐受性好的Taq酶反應體系經優化后，擴增效率在95%以上，即使是在目標基因含量較低時也能夠獲得滿意的擴增，在模板量較高時，也不易中毒，指數擴增期較長。耐受性能較差的Taq酶，即使反應體系經多次優化，擴增效率仍達不到90%，擴增曲線“S”型不明顯，斜率較小，曲線低平。模板量較低時擴增不出來，較高時擴增效果也不理想。所以PCR擴增效率與Taq酶的性能密切相關，選擇高擴增效率的DNA聚合酶對PCR、qPCR能否成功至關重要。

選擇酶動力強的熱啟動Taq酶

Taq酶的酶動力與擴增效率有關。一般熱啟動Taq酶的酶動力越強，PCR擴增的指數增長期越長，‘S型’曲線更加典型，熒光信號值更高，而且更適合做多重PCR檢測。酶動力弱的品牌DNA聚合酶一般只能支持2重反應，在做3重反應時，擴增曲線低矮，熒光信號值較低，無典型擴增曲線，結果很難判定。

選擇靈敏度高的熱啟動Taq酶

一般說，DNA聚合酶的擴增效率高，靈敏度就高，但也有不一致的情況。如果要擴增的樣本目標基因豐度較低，建議對Taq酶的擴增靈敏度進行檢測。

Taq酶的擴增靈敏度進行檢測，常見的檢測方法是將目標基因質粒片段進行10倍或5倍梯度稀釋，在較低的幾個稀釋度進行PCR檢測，選擇檢測靈敏度較高的熱啟動Taq酶。

由此可見，研究者需根據自己的實驗要求和經費情況進行選擇，**做一個梯度稀釋擴增實驗，以檢測熱啟動Taq酶的擴增效率和靈敏度。

北京締一生物科技有限公司 國內總代理的德國MB 產品

MB Taq聚合酶 1 Unit/μl濃度    MB TAQ DNA Polymerase

描述

MB Taq DNA聚合酶是一種高效的3’→5’聚合酶，沒有5’→3’外切核酸酶活性。在72℃和大約pH9的條件下，MB Taq DNA聚合酶達到它最高水平的活性，能夠在大約30秒內擴增標準的1 kb DNA鏈。

Taq酶活性在室溫時被阻斷，例如在準備樣品時。當溫度高于70℃時，Taq聚合酶的抑制被完全逆轉。在94℃ 2分鐘后聚合酶達到完全活化。MB Taq DNA聚合酶帶有10x緩沖液，以便達到理想產率產率和靈敏度，已足以適合大多數的常規用途。

推薦使用

常規和多重PCR；實時熒光定量PCR；T/A克隆；生物素、地高辛或放射性核苷酸標記DNA；雙鏈或單鏈DNA測序。