支原體去除劑在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)中使用方法

哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)中支原體(Mycoplasma)污染是個(gè)比較嚴(yán)重的問題。因?yàn)?/span>支原體污染幾乎可以改變細(xì)胞的所有參數(shù)，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的不準(zhǔn)確、甚至完全錯(cuò)誤。所以支原體祛除劑對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室中也是常備產(chǎn)品之一。締一生物提供的德國MB支原體去除劑Zell Shield可直接加入培養(yǎng)基中使用，詳細(xì)使用使用方法見下文。

Zell Shield支原體去除劑的使用方法：

1）常規(guī)使用

Zell Shield為-18℃避光保存。使用前，建議融化分裝。避免反復(fù)凍融。Zell Shield按1:100直接加入到新鮮配制的培養(yǎng)基。

例如：500ml培養(yǎng)基中添加5ml Zell Shield，混合后在2~8℃保存可至少4周。37℃進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，最多7天需要更換新的含有Zell Shield的培養(yǎng)基，以獲得良好的保護(hù)。

說明：Zell Shield在培養(yǎng)基過濾前或過濾后加均可。如果培養(yǎng)基尚未無菌過濾，可在加入Zellshield后再進(jìn)行無菌過濾。

一般情況下，使用了Zell Shield，就不必再額外添加雙抗了。

2）懸浮沖洗法（適合已有支原體污染的細(xì)胞）

約98％的支原體存在于細(xì)胞表面和細(xì)胞間隙。細(xì)胞傳代前，用干凈的PBS懸浮沖洗3次，就能把70%以上的支原體沖洗下來，再通過低速離心，棄上清，即可祛除大部分支原體（離心后細(xì)胞沉淀，沖洗下來的支原體在上清中）。再繼續(xù)用含1%Zell Shield的培養(yǎng)基持續(xù)培養(yǎng)。細(xì)胞再連續(xù)傳代3次，每次都用PBS對(duì)細(xì)胞進(jìn)行懸浮沖洗，并用含1%Zell Shield的培養(yǎng)基培養(yǎng)（見下圖），即可逐漸祛除細(xì)胞中的支原體。

另外，需要說明的是ZellShield含有氟喹諾酮類藥物，可與其他抗生素聯(lián)合使用，作為耐藥性標(biāo)記。其他抗生素成分不用作耐藥性標(biāo)記。

北京締一生物科技有限公司國內(nèi)總代Ausbian品牌,德國Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)使用的Ausbian澳洲進(jìn)口特級(jí)胎牛血清,新生牛血清，干細(xì)胞培養(yǎng)基,馬血清，德國MB支原體檢測(cè)/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產(chǎn)品。歡迎訪問締一生物官網(wǎng)：www.njjysf.com。聯(lián)系電話:4006661688。