干細胞培養技術之干細胞標準培養方法

分享三種干細胞培養的標準培養方法

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發表時間:2023-10-11 14:52

干細胞培養難度大,需要充足的營養成分對其進行支持,對于培養體系及試驗人員的技術的也有更高的要求。目前常用的標準干細胞培養方法有三種:傳統的飼養層培養法和無飼養層培養法,以及近幾年新興的干細胞直接培養法。

飼養層培養法,先對飼養層細胞進行培養,再將干細胞接種到飼養層細胞上,最后收獲所需的干細胞,該過程需要一周或更長的培養時間。優點:培養干細胞效果相對較好;缺點:實驗流程冗雜,使用的試劑復雜,實驗周期很長,對實驗人員的熟練度有較高要求。

無飼養層培養法,直接培養干細胞,無需培養飼養層細胞。優點:培養流程簡單,缺點:需自行優化培養液,有時需要花大力氣去測試血清、培養基及添加因子的種類和比例,非常耗時耗力,且培養出來的干細胞穩定性也不太容易保證。

干細胞直接培養法是近幾年,隨著干細胞專用培養基的誕生,逐漸開始的干細胞培養法。干細胞直接培養,無飼養層細胞參與。加入的培養液是已經商業標準化的干細胞專用培養基,大多無需配制,可直接使用。優點:培養液無需探索配方,可直接使用;實驗流程簡單。缺點:由于不同廠家的干細胞專用培養基的配方不同,所以有相當多的干細胞挑不到合適的完全培養基,培養效果不好。很多價格昂貴,是傳統培養液(胎牛+普通培養基+添加細胞因子)數倍。

干細胞培養基.jpg

但隨著新技術的不斷革新,近兩年出現的一款Ausbian干細胞完全培養基,以其方便,通用,價格等優勢,基本規避以上缺點,越來越多的實驗人員使用。

1、它是即用型干細胞培養基,解凍后開瓶即用,無需二次配制

2、一款培養可應用在各類干細胞培養中,效果理想,如長期培養,仍可較好地保留細胞的干性;

3、價格適中,與胎牛血清+基礎培養基+細胞因子這類傳統培養體系相比,價格略高或價格相當。

Ausbian干細胞完全培養基的工作原理,在含微量胎牛血清的基礎培養基中,添加一種人永生化干細胞系的條件培養基混合物,共同組成,其中已含有EGFFGFNGFHGFBDNFPDGFVEGFTGF及干細胞分化抑制因子等成分,且為天然比例,更符合干細胞生長繁殖的自然規律,對于各類干細胞具有通用性,且培養效果滿意。

這款Ausbian干細胞完全培養基,可長期儲存在-20冰箱中,一年以上。在使用時,無需額外添加細胞因子或其他人工合成促生長成分,無需二次配制,解凍后即可直接使用,根據細胞生長情況每 2-3 天更換一次培養基即可,實驗人員簡單方便地即可完成促進干細胞增殖、延緩干細胞分化及維持干細胞表型,增加干細胞的傳代次數的目的,在人及動物的胚胎干細胞、間充質干細胞及各種組織來源的成體干細胞的培養中均可使用。由于實驗步驟大幅精簡,因此對實驗人員的操作技術也相對不會過為嚴苛。

通過實驗發現,Ausbian干細胞完全培養基能夠有效維持干細胞的干性,延緩干細胞的分化養出純度更高、遺傳物質更穩定的干細胞

所培養的干細胞。培養細胞有效性方面,許多科研人員對其進行了評估:培養間充質干細胞可以細胞傳代次數 8-10 次、培養成體干細胞可以使細胞的增殖速率增加 300%,實驗數據真實可靠。

人間充質干細胞培養.png人體干細胞培養實驗.png

需要說明的是,由于此款培養基添加了1.5%-2%左右的胎牛血清(經過輻照),Ausbian干細胞完全培養基更適用于科研領域,在細胞治療等臨床項目中應用時,申報工作需做特別說明。

由于干細胞專用培養基的出現,讓干細胞培養變得更簡單;而Ausbian干細胞完全培養基的出現,讓干細胞的培養變得更容易。相信隨著科技的飛速發展和不斷涌現的創新產品,會有越來越多的干細胞新型培養工具得以應用,讓人類在研究和探索干細胞領域的道路上,走得更高更遠。

北京締一生物科技有限公司國內總代Ausbian品牌,德國Minerva-Biolabs微生物污染控制系列。細胞培養實驗使用的Ausbian澳洲進口特級胎牛血清,新生牛血清,干細胞培養基,馬血清,德國MB支原體檢測/祛除試劑盒,DNA污染祛除試劑,支原體PCR/qPCR定量試盒等產品。歡迎訪問締一生物官網:www.njjysf.com。聯系電話:4006661688。

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