懸浮細(xì)胞系如何去除支原體污染

在培養(yǎng)細(xì)胞過程中，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長緩慢，有細(xì)胞培養(yǎng)液提前變黃、渾濁，或者大量漂浮等情況，可以PCR/qPCR方法檢測細(xì)胞是否被支原體污染。對(duì)精心呵護(hù)的珍貴懸浮細(xì)胞系可以使用細(xì)胞支原體去除劑來去除支原體。今天就跟大家介紹德國MB的一款Mynox?細(xì)胞支原體清除劑。

Mynox?是一種無抗生素的生物試劑，可以整合到支原體膜中，損害其完整性。它的活性基于生物物理機(jī)制，因此不會(huì)產(chǎn)生耐藥菌株。其結(jié)果是滲透性內(nèi)流導(dǎo)致支原體膜完全解體。被根除支原體，細(xì)胞可以立即恢復(fù)其原有的形態(tài)和正常增殖速度。迄今為止，Mynox?尚未顯示會(huì)導(dǎo)致正常細(xì)胞特性的任何變化。

1、制備細(xì)胞和『治療液』

使用無菌離心管配制『治療液』。加入1.6 ml 0.125%胰蛋白酶和5 mM EDTA。加入200μl Mynox?(1瓶)。將1.6 ml含有10% (v/v) FCS和10^4 - 10^5細(xì)胞的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)基，從懸浮細(xì)胞培養(yǎng)液中轉(zhuǎn)移到『治療液』混合物中，進(jìn)行渦旋。包括細(xì)胞在內(nèi)的處理混合物的總體積為3.4 ml。

2、Mynox?的處理和去除

37℃孵育30分鐘。將細(xì)胞輕離心(600 × g) 5分鐘，丟棄上清。將細(xì)胞重懸于不含Mynox?的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)基中，置于培養(yǎng)瓶中。

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