細(xì)胞凍存步驟詳解和注意事項(xiàng)

細(xì)胞凍存是細(xì)胞實(shí)驗(yàn)里細(xì)胞保存的一種重要技術(shù)，可以用于長期保存、運(yùn)輸細(xì)胞以及進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。今天小編就跟大家分享細(xì)胞凍存的基本步驟和細(xì)胞凍存的注意事項(xiàng)。

細(xì)胞凍存的基本步驟：

準(zhǔn)備凍存液：制備含有10%-20%的細(xì)胞凍存液，常見成分包括甘油、DMSO、胎牛血清（推薦使用內(nèi)毒素≤3EU/m的Ausbian特級(jí)胎牛血清，細(xì)胞更健康！）等。這些成分可以保護(hù)細(xì)胞免受低溫?fù)p傷，并防止冰結(jié)晶形成。

準(zhǔn)備細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)至80%-90%的密度，用PBS或其他緩沖液洗滌1-2次，以去除細(xì)胞碎片和廢棄物。這一步可以確保細(xì)胞的健康狀態(tài)。

制備細(xì)胞懸液：加入適量的凍存液，將細(xì)胞懸液均勻分配到凍存管或其他容器中。這一步的目的是將細(xì)胞懸浮在凍存液中，以便進(jìn)行后續(xù)的凍存操作。

慢速冷卻：將細(xì)胞凍存管或其他容器放置在-20℃等溫慢速冷卻，使細(xì)胞漸漸地降溫到-80℃以下。這一步的目的是避免細(xì)胞受到過度刺激和損傷。

快速冷凍：將細(xì)胞凍存管或其他容器轉(zhuǎn)移至-80℃的冰箱中，進(jìn)行快速冷凍。這一步可以確保細(xì)胞在低溫下保持穩(wěn)定狀態(tài)。

長期儲(chǔ)存：將凍存的細(xì)胞存儲(chǔ)在-80℃或更低溫度的冰箱中，以保持細(xì)胞的存活和穩(wěn)定性。

在進(jìn)行細(xì)胞凍存時(shí)，需要注意以下幾點(diǎn)：

確保細(xì)胞處于健康狀態(tài)，避免使用已經(jīng)受到損傷或感染的細(xì)胞。

嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程，避免細(xì)胞受到污染。

使用高質(zhì)量的凍存液和容器，確保細(xì)胞的存活和穩(wěn)定性。

在凍存和儲(chǔ)存過程中，保持低溫環(huán)境，避免細(xì)胞受到過度刺激和損傷。

總之，細(xì)胞凍存是細(xì)胞保存的重要技術(shù)，正確的操作步驟和注意事項(xiàng)可以確保細(xì)胞的存活和穩(wěn)定性。