lamp檢測技術(shù)的工作原理介紹

生產(chǎn)用于反應的起始材料：

引物設(shè)計：LAMP擴增過程中使用了多個引物，包括兩對外部引物（F3和B3）以及兩對內(nèi)部引物（FIP和BIP），以及一個環(huán)引物（Loop primer）。這些引物的設(shè)計是基于目標DNA或RNA的特定序列，以確保高度特異性的擴增。

循環(huán)擴增：

生產(chǎn)啞鈴狀結(jié)構(gòu)的形成外部引物較短（21-24bp），并且在反應混合物中的濃度較低，與模板結(jié)合的速度比內(nèi)部引物慢。向前和向后的內(nèi)部和外部引物與BstDNA聚合酶（在60-65°C下顯示出高鏈置換活性）相結(jié)合，形成啞鈴狀DNA結(jié)構(gòu)

伴隨循環(huán)的延伸和再循環(huán)：

隨后的階段涉及自引模板的指數(shù)擴增和鏈的替換，從而產(chǎn)生雙鏈DNA的混合物。LAMP的最終輸出是花椰菜狀結(jié)構(gòu)。

與PCR不同，LAMP在單一溫度下（通常為60-65℃）進行擴增，因此不需要溫度循環(huán)。這有助于操作簡單且耗時較短。

特殊結(jié)構(gòu)的引物：LAMP技術(shù)中的引物具有特殊的結(jié)構(gòu)，其中FIP（Forward Inner Primer）由F1c和F2組成，BIP（Backward Inner Primer）由B1c和B2組成。這些引物的結(jié)構(gòu)促使在擴增過程中產(chǎn)生大量的特定結(jié)構(gòu)的產(chǎn)物，從而進一步提高擴增效率。

自我啟動的擴增過程：LAMP技術(shù)通過自我啟動的過程在目標核酸序列上進行擴增。一旦引物與目標序列的互補區(qū)域匹配，引物的結(jié)構(gòu)促使產(chǎn)物不斷生成，形成一個DNA“蘑菇云”狀的結(jié)構(gòu)。

環(huán)結(jié)構(gòu)的形成：LAMP擴增的一個關(guān)鍵特征是環(huán)結(jié)構(gòu)的形成。在LAMP擴增過程中，Loop引物在互補區(qū)域與目標序列結(jié)合，促使產(chǎn)物的循環(huán)形成。這種環(huán)結(jié)構(gòu)不僅穩(wěn)定了產(chǎn)物，還使得新的引物不斷與目標序列結(jié)合，從而實現(xiàn)高效擴增。

產(chǎn)物分析：LAMP擴增產(chǎn)物通常通過肉眼可見的方法進行分析，例如使用熒光染料，pH指示劑或者裸眼觀察沉淀物等。產(chǎn)物的積累會導致可觀察的變化，從而確定擴增是否成功。