支原體污染熒光定量pcr檢測(cè)（qPCR法）的優(yōu)勢(shì)

支原體污染熒光定量pcr檢測(cè)法，是很多科研實(shí)驗(yàn)室代替傳統(tǒng)的培養(yǎng)法與指示細(xì)胞法進(jìn)行檢測(cè)。無(wú)論是歐洲藥典、日本藥典、還是中國(guó)藥典，均對(duì)細(xì)胞相關(guān)的臨床項(xiàng)目有明確的支原體檢測(cè)指標(biāo)的要求。

支原體熒光定量pcr檢測(cè)法，簡(jiǎn)稱qPCR法，與動(dòng)輒30天起步的傳統(tǒng)培養(yǎng)法相比，qPCR技術(shù)的反應(yīng)時(shí)間相對(duì)較短，通常在幾小時(shí)內(nèi)就可以完成，大大縮短了用于檢測(cè)對(duì)的時(shí)間成本。

支原體污染熒光定量pcr檢測(cè)qPCR法的優(yōu)勢(shì)?

靈敏度高

qPCR技術(shù)可以在非常低的病原體濃度下進(jìn)行檢測(cè)，這種高靈敏度使得qPCR能夠有效地檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)體系、實(shí)驗(yàn)或生產(chǎn)流程中，是否發(fā)生支原體污染，即使在污染的早期階段，也能夠得到準(zhǔn)確的結(jié)果。

并且配合靈敏度標(biāo)準(zhǔn)品，進(jìn)行靈敏度的驗(yàn)證，進(jìn)一步完善方法學(xué)驗(yàn)證的流程。

以德國(guó)MB Venor Gem qEP為例，檢測(cè)限可達(dá)到≤10CFU/ml。

特異性強(qiáng)

qPCR技術(shù)可以使用特異性引物和探針來(lái)選擇性地?cái)U(kuò)增目標(biāo)支原體的DNA序列。通過(guò)設(shè)計(jì)引物和探針與目標(biāo)序列高度匹配，可以避免非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物的產(chǎn)生，從而提高檢測(cè)的特異性。

以德國(guó)Minerva Biolabs公司的Venor Gem qEP為例，一次檢測(cè)即可涵蓋所有常見易感染細(xì)胞的支原體物種（包括歐洲藥典規(guī)定的9種支原體）。與細(xì)菌和真核DNA無(wú)交叉反應(yīng)。

定量能力

與傳統(tǒng)的PCR技術(shù)相比，qPCR可以提供定量信息。通過(guò)利用熒光探針或DNA染料，可以實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)PCR反應(yīng)過(guò)程中的熒光信號(hào)強(qiáng)度，從而得到目標(biāo)序列的定量結(jié)果。這種定量能力使得qPCR技術(shù)在支原體載量的測(cè)定和污染進(jìn)程的監(jiān)測(cè)中非常有用。

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