質粒作為基因克隆和表達的常用載體,其純度和質量的高低直接影響后續實驗的成功與否。然而,在質粒提取過程中,一個常見的問題就是基因組DNA的污染。這種污染不僅會影響質粒的純度和質量,還可能對實驗結果產生不利影響。因此,了解如何避免基因組DNA污染對于保證實驗成功至關重要。 一、選擇適當的質粒提取方法 不同的質粒提取方法有不同的原理和操作步驟,選擇合適的提取方法對于避免基因組DNA污染至關重要。例...
急性髓系白血病(AML)是一種預后極差的血液系統惡性腫瘤,也是成人中最常見的白血病類型,其臨床治療一直面臨極大挑戰。近年來, 免疫治療進展突飛猛進,特別是以T細胞為核心的免疫治療,在腫瘤治療中取得了令人矚目的臨床效果,但其在AML中療效不佳。 因此,急需探索新的AML免疫治療策略。自然殺傷細胞(NK)作為天然免疫系統的重要組成部分,具備主要組織相容性復合體(major histocompat...
質粒提取是一個常見的分子生物學實驗,對于實驗環境有比較高的要求,要盡可能避免雜質DNA等核酸污染。德國MB公司生產的PCR Clean,高效清除核酸污染。 質粒是生物實驗中常用的工具,尤其在基因工程和分子生物學領域。然而,在質粒提取的過程中,常常會遇到基因組DNA(gDNA)混入的問題,這不僅影響了實驗結果的準確性,還可能對后續的實驗步驟造成干擾。本文旨在探討質粒提取實驗中基因組DNA混入的...
原代小膠質細胞培養是一個復雜的過程,需要一系列特定的儀器和設備來確保細胞的健康生長和實驗的成功。以下是一些在原代小膠質細胞培養過程中可能需要的儀器設備:生物安全柜:用于在無菌環境下進行細胞培養、操作和處理等,以防止微生物污染。 細胞培養箱:用于提供恒定的溫度、濕度和氣體環境(如5% CO?),這是細胞生長所必需的。離心機:用于分離細胞和培養基,以及洗滌細胞。顯微鏡:用于觀察細胞的生長情況、形...
原代小膠質細胞培養是一個涉及多個步驟的復雜過程,以下是對其培養方法的詳細闡述:一、原理原代小膠質細胞培養主要利用混合膠質細胞培養物分層生長的特性,以及小膠質細胞半懸浮生長的特點,通過搖床震蕩法將皮層來源的混合膠質細胞培養物最上層的小膠質細胞震搖下來繼續培養,以達到分離和純化小膠質細胞的目的。二、材料與儀器材料:新生1-3天的仔鼠、含10%胎牛血清的DMEM培養基、D-PBS液、消化液(0.2...
在生物科學的研究領域中,血清作為生物體內環境的重要組成部分,其包含的各種酶和蛋白質為我們提供了理解生物體功能的關鍵線索。牛血清,尤其是其含有的胺氧化酶,因其獨特的生物活性和在細胞培養、藥物篩選等研究中的廣泛應用,而備受科學家們的關注。本文將重點探討牛血清中的胺氧化酶及其在生物學研究中的重要性。牛血清是一種含有多種生物活性物質的復雜液體,主要由血漿去除纖維蛋白原而形成。在生物學研究中,牛血清被...
胎牛血清進口的相關規定可以歸納如下:一、進口資質與備案出口國資質:出口國農業部需要頒發牛血清采集、收購的許可證(但中國對此不做要求)。輸華企業備案:輸華企業需要在中國國家質量監督檢驗檢疫局備案,中國的收貨公司需要提出申請,并得到國家總局的許可。進口商資質:進口商需要具備進出口經營權,并提供相關的報關報檢委托書。二、報關資料與證明基本資料:包括商業合同、裝箱單、商業相關證件等。檢疫證書:血清檢...
進口胎牛血清融化三步法推薦如下:**步:室溫或較低溫水浴初步融化溫度:室溫或15-20℃(新接的自來水溫度約24℃上下)時間:100ml血清:35分鐘(室溫)或5分鐘(15-20℃水浴)500ml血清:90分鐘(室溫)或18分鐘(15-20℃水浴)1000ml血清:100分鐘(室溫)或20分鐘(15-20℃水浴)注意:此步驟的目的是使血清初步融化,降低冰塊大小,為后續步驟做準備。第二步:中溫...
遺傳信息的保存不斷受到內源性和外源性因素的挑戰。保護遺傳信息的重要性不言而喻。通用轉錄因子IIH (TFIIH)對轉錄和核苷酸切除DNA修復(NER)至關重要,是我們身體自身“DNA修復團隊”之一;XPD解旋酶是TFIIH的核心組成成分,XPD的解旋酶功能是核苷酸切除DNA修復的關鍵步驟,與轉錄起始無關,XPD僅作為其他因子的支架。像嗅探犬一樣,NER檢測出受損的標記區域,追蹤受損的DNA,...
在細胞培養技術中,胎牛血清作為一種常用添加劑,在免疫細胞的培養過程中發揮著重要的作用。本文將詳細探討為什么培養免疫細胞需要胎牛血清,并參考相關數據和文獻進行論證。 一、胎牛血清的特性和來源 胎牛血清5-8月齡牛胚胎。與新生牛和小牛血清相比,胎牛血清因其從未接觸過外界,所以抗體含量明顯降低,這使得它與培養細胞發生交叉反應的風險也較低。 二、胎牛血清在免疫細胞培養中的作用 提供營養物質和穩定環境...
遺傳信息通常沿著一條單行道傳播:寫在DNA中的基因是制造RNA分子的模板,然后將其翻譯成蛋白質。1970年,科學家發現一些病毒具有稱為逆轉錄酶的酶,可以將RNA轉錄成DNA。現在,科學家們發現了一個更奇怪的轉折,逆轉錄酶的細菌版本讀取RNA作為模板,以制造寫在DNA中的全新基因。然后,這些基因被轉錄回RNA,當細菌被病毒感染時,RNA被翻譯成保護性蛋白質。相比之下,病毒逆轉錄酶不會產生新基因...
EP文件在醫療和實驗室領域通常指的是與臨床和實驗室標準化協會(CLSI)相關的指導文件,這些文件為體外診斷(IVD)產品的性能驗證提供了詳細的指導。關于特異性(Specificity)的文件,雖然沒有直接提到“EP文件中關于特異性的文件”的具體文件名,但可以參考CLSI發布的一系列EP文件,特別是那些涉及性能驗證和分析特異性的文件。EP文件的通用性:EP文件通常涵蓋了體外診斷產品的各個方面,...
更換培養基:如果細胞對新配置的培養基不適應,可以逐...
DNA中有RNA污染在分子實驗中是一個需要關注的問題,其對實驗結果和后續分析可能產生多方面的影響。本文就為大家解答DNA中有RNA污染潛在影響: 一、實驗結果的準確性受影響 錯誤的數據解讀:在RNA相關的實驗中,如果DNA污染了RNA樣本,可能導致研究者錯誤地解讀實驗結果。例如,在基因表達分析中,DNA污染可能干擾RNA的逆轉錄和PCR擴增過程,導致對基因表達水平的錯誤估計。影響基因表達分析...
病毒學作為生物學的一個重要分支,專注于研究病毒的形態、結構、復制、感染機制以及病毒與宿主之間的相互關系。在這個復雜的領域中,細胞實驗發揮著重要的作用,為病毒學的研究提供了堅實的基礎。 一、病毒的生命周期與細胞密切相關 病毒是一種非細胞生命形態,其生命周期的幾乎全部階段都需要在宿主細胞內完成。病毒通過附著、侵入、脫殼、生物合成、裝配和釋放等步驟在細胞內進行復制和繁殖。因此,要深入了解病毒的生物...
在病毒學研究中,細胞實驗室是進行病毒培養、復制和感染機制研究的重要場所。然而,微生物污染是這一過程中常見且嚴重的問題,它不僅影響實驗結果的準確性,還可能對研究人員的健康構成威脅。因此,避免細胞實驗室發生微生物污染在病毒學研究中顯得尤為重要。 一、微生物污染對病毒學研究的影響 實驗結果的不準確性:微生物污染會干擾病毒的正常生長和復制,導致實驗結果出現偏差。例如,細菌或真菌的污染會使培養基變渾濁...
單細胞基因組學是一個精密的科研學科,每一個單獨的細胞都彌足珍貴,包含著多樣的遺傳信息,是打開生命科學一把鑰匙。在進行單細胞基因組學的實驗室中,確保實驗環境的純凈、避免細胞污染十分重要。德國MB公司生產的Mycoplasma Off,高效清除實驗環境中的支原體、細菌等微生物污染 單細胞基因組學提供了一種強大的方法來了解變異如何影響基因表達,特別是在人類大腦中眾多細胞類型中。此外,它可能會改善我...
在單細胞基因組學的探索之旅中,我們追尋的是單個細胞內部那細微而復雜的遺傳奧秘。每一個細胞都包含重要的遺傳信息,對于理解生命活動、疾病機制以及開發個性化治療具有重要的價值。然而,在這項精密的科研工作中,一個微小的污染都可能令實驗毀于一旦。因此,避免細胞污染在單細胞基因組學實驗中顯得尤為重要。 一、確保實驗準確性 單細胞基因組學實驗的目標在于深入解析單個細胞的基因表達和遺傳變異。細胞污染可能導致...
健康人體細胞的 DNA共有 23對染色體。額外的染色體通常會導致有害的基因失衡。對于生物體來說,額外的染色體通常是一個問題,可能會破壞發育或導致疾病。但有些細胞反而受益——例如,癌細胞或致病酵母菌可以利用額外的染色體逃避治療,并產生抗藥性。來自柏林夏里特大學的一組研究人員現在已經破譯了酵母是如何設法彌補這種基因失衡的。他們的研究結果發表在Nature雜志上,這可能會為治療耐藥腫瘤或真菌感染提...
細胞在去除支原體后,仍然有可能再次被污染。支原體污染是細胞傳代及培養中的常見問題,由于支原體通常依靠與細胞競爭培養基中的養分存活,因此即使細胞已經去除了支原體,如果培養環境或操作過程中再次引入支原體,細胞仍然有可能再次被污染。為了防止細胞再次被支原體污染,可以采取以下措施:確保細胞培養環境干凈、無菌,包括培養基、培養瓶、吸管等。定期進行支原體檢測,一旦發現支原體污染,及時采取措施處理。在細胞...
隨著生物技術的快速發展,CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)技術已成為現代基因編輯領域中的一項創新技術。然而,盡管CRISPR技術具有高度的特異性和效率,但在實驗過程中可能遭遇的DNA和核酸酶污染問題,卻可能對其結果產生深遠的影響。本文將對這兩種污染及其對CRISPR實驗的影響進行深入的探討。 一、...
熒光信號指數擴增階段是指在實時定量聚合酶鏈式反應(qPCR)過程中,熒光信號呈指數增長的一個階段。在這個階段,每個循環積聚的產物準確加倍(假定100%反應效率),PCR產物量的對數值與起始模板量之間存在線性關系。這是因為在這個階段,所有試劑均充足,反應的動力學推動反應有利于擴增子加倍,所以產物出現指數級擴增。在這個階段進行定量分析最為合適,因為Cq值與初始模板量的對數之間存在線性關系。德國M...
核酸分子雜交技術定量的原理主要基于堿基互補配對原則。在適宜的條件下,如特定的溫度及離子強度等,具有同源性的兩條核酸單鏈(通常是待測核酸和探針)能夠按照堿基互補原則形成穩定的雙鏈結構,即雜交體。這種雜交過程是高度特異的,可以用于定性或定量檢測特定的RNA或DNA序列片段。具體來說,核酸分子雜交技術定量通常涉及以下幾個步驟:探針的設計與標記:根據目標核酸序列設計探針,并通過放射性核素、熒光物質或...
腫瘤細胞培養是一種常用的實驗技術,在癌癥研究、藥物篩選和生物醫學研究中具有重要作用。然而,細菌污染是細胞培養過程中常見且嚴重的問題。細菌污染不僅會影響實驗結果的準確性,還會導致細胞培養失敗,浪費資源和時間。因此,了解細菌污染的來源及其影響,對制定有效的防控措施具有重要意義。 細菌污染的來源環境污染:實驗室空氣中的塵埃、實驗臺面的殘留物、培養箱和顯微鏡等設備如果沒有定期清潔和消毒,都可能成為細...