細胞實驗中，除了常規的細胞培養、細胞染色、細胞分離與融合、細胞功能檢測、細胞信號傳導與基因編輯等研究方法外，還有多種重要的研究方法。這些方法在細胞生物學研究中發揮著關鍵作用，有助于深入了解細胞的結構、功能和生命活動規律。以下是一些重要的細胞實驗研究方法： 一、顯微技術顯微技術是觀察細胞形態結構的基本方法，包括光學顯微鏡、電子顯微鏡和掃描隧道顯微鏡等。 光學顯微鏡：普通光學顯微鏡可以觀察細胞的...
在支原體提取中，EDTA（乙二胺四乙酸）的作用和用途主要體現在以下幾個方面：一、EDTA的基本性質EDTA是一種有機化合物，無臭無味，熔點為250℃（分解），常溫常壓下為白色粉末。它能溶于氫氧化鈉、碳酸鈉及氨溶液中，也能溶于沸水，但微溶于冷水，不溶于醇及一般有機溶劑。EDTA是一種重要的絡合劑，能與多種金屬離子形成穩定的絡合物。二、EDTA在支原體提取中的具體作用螯合金屬離子：EDTA是一種...
締一生物提供的Ausbian特級胎牛血清(貨號：WS500T)，已助力多項科研成果發表。今天跟大家分享的就是一篇利用Ausbian胎牛血清培養人皮膚成纖維細胞BJ Cell的文獻。 該論文發表在《Inflammation》標題為：Specific Knockdown of the NDUFS4 Gene Reveals Important Roles of Ferroptosis in UV...
7月20日，國際學術期刊Nature Communications在線發表了中國科學院分子細胞科學**創新中心（生物化學與細胞生物學研究所）陳劍峰研究組和同濟大學生命科學與技術學院/附屬養志康復醫院林昶東課題組的最新合作研究成果“Ca2+ transients on the T cell surface trigger rapid integrin activation in a times...
細菌有特殊的防御機制來保護自己免受病毒的侵害，CRISPR-Cas系統就是其中之一。研究領域的各路高手紛紛大力于開發源于不同細菌中的各種CRISPR-Cas系統，已經成為分子診斷技術的豐富資源。位于德國維爾茨堡的亥姆霍茲RNA感染研究所(HIRI)的研究人員又進一步開發了一種新方法來擴展這個CRISPR-Cas工具箱。他們的新方法，——簡稱為PUMA（ (Programmable tracr...
在細胞生物學和生物醫學研究領域，細胞培養實驗是一項至關重要的技術。其中，細胞消化作為細胞培養過程中的一個關鍵環節，對細胞傳代、實驗準備及后續研究具有不可忽視的作用。 一、什么是細胞消化？細胞消化是指通過特定的物理、化學或生物方法，將已經貼壁生長或聚集的細胞從培養基質上解離下來，形成單個細胞懸液的過程。這一過程不僅有助于細胞的傳代培養，還為后續的細胞實驗（如增殖、凋亡、遷移、分化等）提供了必要...
在生物醫學和細胞生物學研究中，細胞培養是一項基礎而核心的技術。它不僅為科學家提供了觀察和研究細胞行為、生理、病理過程的平臺，還是藥物研發、基因治療等領域不可或缺的實驗手段。完整的細胞培養全流程涉及多個精心設計的步驟，其中，胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS）作為培養基的關鍵成分，其選擇和使用對細胞培養的成功至關重要。完整的細胞培養全流程1、準備階段：設備清洗與消毒：確保...
在任何實驗室中使用多種細胞系都會導致一種細胞系被另一種細胞系污染的可能性。培養物的交叉污染困擾著許多研究人員，經常導致錯誤的結果、結果的撤回、掩蓋以及在無意中使用錯誤的細胞后數據和結果的一些徹頭徹尾的“偽造”。1960年代和1970年代科研工作者初步意識到這不是一個微不足道的問題，當時觀察到許多細胞系已被**個建立的人類細胞系HeLa細胞交叉污染。這種情況已經發生到一定程度，以至于許多細...
在21世紀生物醫學的廣闊領域中，干細胞研究無疑發揮著重要作用。近日，發表在《Nature》上，標題為：“Metabolic regulation of species-specific developmental rates”的文章，科研人員里用多能干細胞建立了一個體外系統，該系統能夠模擬小鼠和人類胚胎之間兩倍的發育速率差異。該系統通過體節發生時鐘的周期來定量測定發育速度，體節發生時鐘是一種...
在病毒學研究的廣闊領域中，細胞實驗扮演著至關重要的角色，它們不僅是病毒復制和傳播的重要平臺，也是揭示病毒與宿主細胞相互作用機制的關鍵工具。而在這一系列復雜而精細的實驗中，胎牛血清（Fetal Bovine Serum, FBS）作為細胞培養中的關鍵成分，其質量和特性直接影響著實驗結果的準確性和可靠性。本文旨在探討胎牛血清在病毒學細胞實驗中的關鍵角色及其所需滿足的嚴格要求。一、無病毒污染：安全...
在國家自然科學基金項目（批準號：82250002、31861143026、21825701）等資助下，中國醫學科學院血液學研究所王建偉教授團隊聯合北京大學生命科學學院伊成器教授團隊在造血干細胞 衰老機制研究方面取得進展。相關成果以“衰老相關的非經典TRMT6-TRMT61A 信號傳導損傷造血干細胞（Age-related non-canonical TRMT6-TRMT61A signa...
核酸雜交技術，又稱核酸分子雜交技術，是指兩條或多條互補的核酸鏈（DNA與DNA、DNA與RNA、RNA與RNA等）在適當條件下通過Watson-Crick堿基配對原則結合形成雙鏈的過程。這一過程的原理基于核酸序列的互補性，即腺嘌呤(A)與胸腺嘧啶(T)之間形成兩個氫鍵，鳥嘌呤(G)與胞嘧啶(C)之間形成三個氫鍵。在核酸雜交過程中，互補的兩條核酸鏈通過堿基間的氫鍵相連，形成穩定的雙鏈結構，從而...
在細胞培養和保存過程中，支原體污染是一個常見且棘手的問題。支原體是一類微小的原核生物，它們能夠附著在細胞表面或通過細胞膜進入細胞內，對細胞生長和實驗結果產生顯著影響。對于需要長期保存和頻繁復蘇的凍存細胞而言，防止支原體污染尤為重要。本文將從多個方面探討如何有效避免凍存細胞被支原體污染。 一、源頭控制：確保起始細胞的無菌狀態1.嚴格篩選起始細胞在進行細胞凍存之前，必須確保起始細胞的無菌狀態。這...
細胞復蘇是生物學和醫學研究中一項至關重要的技術，它涉及將凍存在液氮或-70℃冰箱中的細胞解凍后重新培養，使細胞恢復生長的過程。然而，細胞復蘇過程中存在許多因素可能影響其成功率。本文將探討如何提高細胞復蘇的成功率，從準備工作、操作過程到后續管理，提供一系列實用的建議。一、充分的前期準備1. 選擇合適的凍存管使用內旋設計的凍存管可以減少因液氮流入導致的爆炸風險。如果只有外旋的凍存管，取出后應盡快...
締一生物提供的Ausbain特級胎牛血清來自澳洲進口血源，十余年來助力多個科研新進展，廣受科研人員好評。今天為大家分享的就是使用Ausbain特級胎牛血清在2023年月1月2日，在《Cell Proliferation》上發表的論文，標題為：“Antigen-specific TCR-T cells from Rag2 gene-deleted pluripotent stem cells ...
基因編輯技術是十分重要的分子生物學實驗，需要對實驗環境進行嚴格的的控制，防治雜質核酸污染。德國MB公司生產的PCR Clean，即用型噴霧試劑，可以清除實驗環境中的核酸污染。 DdmDE系統的結構基礎是理解其質粒消除機制的關鍵。根據當前的研究，DdmDE系統的結構基礎可以詳細描述如下：一、系統組成DdmDE系統由兩個主要組件組成：DdmD和DdmE。 DdmD：一種解旋酶-核酸酶融合蛋白，具...
近年來，隨著生物技術的飛速發展，科學家們在基因編輯和防御系統領域取得了諸多突破性進展。哥倫比亞大學的研究人員利用低溫電子顯微鏡（cryo-EM）深入研究了霍亂弧菌中的DdmDE防御系統，揭示了其質粒消除的分子機制。這一發現不僅為理解原核生物如何抵御外來遺傳元件提供了新視角，也為未來基因工程工具的開發奠定了基礎。分子生物學需要嚴格控制實驗室中的衛生，避免發生核酸污染，德國MB公司生產的PCR ...
雖然COVID-19疫苗使許多人接觸到基于RNA的藥物，但RNA寡核苷酸已經在市場上用于治療杜氏肌營養不良癥和淀粉樣變性等疾病多年。與傳統的小分子藥物相比，RNA療法具有許多優勢，包括它們能夠處理細胞內幾乎任何遺傳成分，并引導CRISPR等基因編輯工具到達目標。 然而，核糖核酸的前景目前受到全球快速增長的需求超過該行業生產能力的限制。化學合成RNA的標準方法是在20世紀80年代發明的，...
在進行PCR擴增時，發現部分樣本的擴增曲線呈現斜直線型，而非正常的平滑S型曲線。這種異常曲線表明PCR反應可能存在問題，導致擴增效率不穩定或擴增產物非特異性。 原因分析：管蓋未蓋緊：由于每天處理的標本量較大，操作人員在加樣后可能未將PCR管蓋緊，導致在擴增過程中反應液蒸發，管內體積減少。這不僅改變了讀取熒光的標準，還可能導致探針濃度增加，進而形成斜直線型擴增曲線。耗材問題：使用的PCR反應管...
跑PCR結果總不滿意的原因是多方面的，涉及引物設計、模板DNA質量、PCR反應條件、實驗室操作以及儀器狀態等多個環節。以下是一些常見的PCR結果不滿意狀況及其原因分析：一、PCR結果不滿意的常見狀況1.無擴增產物 原因分析：引物設計不當(如特異性差、引物間存在互補性)、模板DNA質量差(如降解、污染)、PCR反應條件設置錯誤(如退火溫度不合適、循環次數不足)、酶失活或未加入酶等。2.非特異性...
長鏈非編碼RNA (Long non-coding rna, lncRNAs)是數量最多、種類很多的一類非編碼RNA。它們定位于細胞核、細胞質或兩個區室，并通過多種機制在多個水平上調控基因表達。LncRNAs往往比蛋白質編碼基因進化得更快，并且具有更高的組織和發育階段特異性表達。lncRNA最初被認為是錯誤轉錄的副產物，沒有生物學功能，現在被認為參與了許多生物學過程，如免疫反應、細胞凋亡、多...
hiPSC：人類誘導多能干細胞的培養與應用 人類誘導多能干細胞（hiPSC）是一類通過基因編輯技術（如CRISPR-Cas9）對已經高度分化的人體細胞進行重新逆分化得到的多能性干細胞。這類細胞具有自我更新和分化成多種細胞類型的能力，為科學家在疾病模型構建、藥物篩選及再生醫學等領域提供了強大的工具。 hiPSC的培養方法hiPSC的培養過程復雜且需要精細操作，但現代技術的發展已經大大簡化了這一...
來自新加坡-麻省理工學院研究與技術聯盟(SMART)的研究人員，麻省理工學院在新加坡的研究企業，已經開發出一種新的方法來生產臨床劑量的可存活的自體嵌合抗原受體(CAR) T細胞的超小型自動化封閉系統微流控芯片，大約是一副紙牌的大小。這是**利用微生物反應器生產自體細胞治療產品。具體來說，新方法成功地用于制造和擴增CAR-T細胞，這些細胞與使用現有系統在更小的占地面積和更少的空間中生產的細胞一...
過量的間質和癌癥相關成纖維細胞(CAF)促進癌癥進展并促進免疫逃避。對基質操縱免疫微環境的機制的深入了解有助于改善癌癥的治療。 發表在《Cancer Research》上，標題為“Stromal Reprogramming through Dual PDGFRα/β Blockade Boosts the Efficacy of Anti-PD-1 Immunotherapy in Fibr...
qPCR檢測支原體對細胞數有一定的要求，但這一要求通常是通過細胞沉淀中的DNA量來體現的，而不是直接通過細胞數量來規定。具體來說，進行qPCR檢測時，需要保證樣本中的DNA含量足夠，以便能夠準確地進行擴增和檢測。在支原體qPCR檢測中，如果以細胞沉淀為樣本，通常需要加干冰/冰袋寄送2~3管PBS洗滌后的細胞沉淀，并保證每管的細胞數量≥10^6個。這是為了確保提取的DNA量足夠用于qPCR反應...
